Question

【題目】人工瘤胃模仿了牛羊等反芻動(dòng)物的胃，可用來發(fā)酵處理秸稈，提高秸稈的營養(yǎng)價(jià)值。為了增強(qiáng)發(fā)酵效果，研究人員從牛胃中篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株，實(shí)驗(yàn)流程示意圖如下圖所示。

請(qǐng)回答下列問題：

（1）步驟A是_____________，可以通過此步驟增加__________________________。

（2）研究人員用_____________法篩選纖維素分解菌，這種方法能夠通過顏色反應(yīng)直接對(duì)微生物進(jìn)行篩選。培養(yǎng)基中透明圈的大小與纖維素酶的_____________有關(guān)。

（3）在涂布平板時(shí)，取少量菌液（不超過0.1mL）滴加到培養(yǎng)基表面，菌液量不宜過多的原因是_______________________________________。

（4）研究人員用篩選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株甲和乙，在不同pH條件下進(jìn)行發(fā)酵，測(cè)得發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果見下表，推測(cè)菌株_____________更適合用于人工瘤胃發(fā)酵，理由是__________________________。

注：纖維素酶活性用U表示。

Answer 1

【答案】選擇培養(yǎng)纖維素分解菌的濃度剛果紅染色量與活性培養(yǎng)基表面的菌液會(huì)出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果乙瘤胃是酸性環(huán)境，菌株乙在酸性環(huán)境下酶的活性更高

【解析】

纖維素分解菌的篩選實(shí)驗(yàn)流程為：取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上、挑選產(chǎn)生透明圈的菌落。根據(jù)題圖，從牛胃中篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株，首先從牛胃取樣，經(jīng)過A步驟后進(jìn)行梯度稀釋，故A應(yīng)為選擇培養(yǎng)，目的是通過選擇培養(yǎng)增加纖維素分解菌的濃度，以確保能夠從樣品中分離得到所需要的微生物；纖維素分解菌的鑒別可以使用剛果紅染液，在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，不能形成紅色復(fù)合物，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌，透明圈越大，纖維素分解菌分泌的纖維素酶活性越高；在涂布平板時(shí)，由于培養(yǎng)基表面的菌懸液會(huì)出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果，所以滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多。

（1）步驟A是選擇培養(yǎng)，該步驟可增加纖維素分解菌的濃度。

（2）篩選纖維素分解菌常用剛果紅染色法；培養(yǎng)基中透明圈的大小與纖維素酶的量和活性有關(guān)。

（3）在涂布平板時(shí)，菌液量不宜過多的原因是菌液過多會(huì)使培養(yǎng)基表面的菌液出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果 。

（4）根據(jù)表中數(shù)據(jù)顯示，甲菌株在pH=8時(shí)酶活性最高，乙菌株在pH=5時(shí)酶活性最高，因?yàn)榱鑫甘撬嵝原h(huán)境，因此乙菌株更適合用于人工瘤胃發(fā)酵。