Question

【題目】科研人員為了分離、篩選藍(lán)莓果酒專用酵母來(lái)改善藍(lán)莓果酒的品質(zhì)，進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)：

① 取不同品種成熟藍(lán)莓制果漿，置于恒溫培養(yǎng)箱中自然發(fā)酵至產(chǎn)生大量氣泡和明顯酒味；

② 將藍(lán)莓發(fā)酵液梯度稀釋后，進(jìn)行涂布平板操作，每個(gè)濃度梯度3個(gè)平板，并在恒溫下培養(yǎng)2d，根據(jù)酵母菌菌落特征挑取單菌落；

③ 將挑取的單菌落擴(kuò)大培養(yǎng)后，通過(guò)平板劃線法分離純化并保存；

④ 檢測(cè)篩選菌株的發(fā)酵性能，得到如下實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

品種	乙醇體積分?jǐn)?shù)/%					pH
	8%	10%	12%	14%	15%	4.00	2.98	2.03	1.48
葡萄釀酒酵母	++++	++++	+	-	-	++++	++++	-	-
BL-21	++++	+++	+	-	-	++++	++++	-	-
BF-09	++++	++++	++	-	-	++++	++++	+	-
BF-17	++++	++++	++	+	-	++++	++++	++	-

注：“-”表示不產(chǎn)氣；“+”表示產(chǎn)氣，“+”越多產(chǎn)氣越多。

請(qǐng)分析回答：

（1）步驟①恒溫培養(yǎng)箱的溫度控制在20℃左右，其主要目的是________________________。

（2）步驟②中，發(fā)酵液應(yīng)使用無(wú)菌水進(jìn)行梯度稀釋。稀釋涂布平板法依據(jù)的原理是____________。

（3）配制培養(yǎng)某的主要步驟是：計(jì)算→稱量→溶化→ ______→倒平板。在接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是________________________。

（4）步驟③平板劃線時(shí)，常用的工具是接種環(huán)，對(duì)接種環(huán)的處理要求是__________________。

（5）固體培養(yǎng)基常用瓊脂作凝固劑，理想的凝固劑應(yīng)具有的特點(diǎn)是____________（多選）。

A．含有某些特殊的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) B．消毒滅菌不會(huì)改變其特性

C．能被微生物分解和利用 D．微生物生長(zhǎng)溫度范圍內(nèi)保持固體狀態(tài)

E．配制方便且有良好的透明性

（6）根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果推知，____________（品種）是較理想的釀酒菌種。

Answer 1

【答案】使酵母菌細(xì)胞快速生長(zhǎng)、繁殖 在稀釋度足夠高的菌液里，將聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落 滅菌 檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格 每次劃線前后都要用灼燒法對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌 BDE BF-17

【解析】

1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型．果酒制作的原理：（1）在有氧條件下，反應(yīng)式如下：；（2）在無(wú)氧條件下，反應(yīng)式如下：。2、稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基表面進(jìn)行培養(yǎng)；在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落．

（1）酵母菌生長(zhǎng)的適宜溫度是18-25℃，所以步驟①恒溫培養(yǎng)箱的溫度控制在22℃左右的目的是為酵母菌細(xì)胞生長(zhǎng)、繁殖提供適宜的溫度．

（2）步驟②中，發(fā)酵液應(yīng)使用無(wú)菌水進(jìn)行梯度稀釋．稀釋涂布平板法依據(jù)的原理是在稀釋度足夠高的菌液里，將聚集在一起的菌種分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落．

（3）配制培養(yǎng)某的主要步驟是：計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。在接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格．

（4）步驟③平板劃線時(shí)，常用的工具是接種環(huán)，對(duì)接種環(huán)的處理要求是每次劃線前后都要用灼燒法對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌．

（5）固體培養(yǎng)基常用瓊脂作凝固劑，理想的凝固劑應(yīng)具有的特點(diǎn)是消毒滅菌不會(huì)改變其特性、微生物生長(zhǎng)溫度范圍內(nèi)保持固體狀態(tài)、配制方便且有良好的透明性．故選：BDE．

（6）分析表格中的發(fā)酵性能可知，BF-17對(duì)乙醇和酸的耐受性最強(qiáng)，是較理想的釀酒菌種．