Question

【題目】下圖是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過程，下表記錄了在適宜條件下培養(yǎng)一段時間后的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，回答下列相關(guān)問題：

(1)如圖，取10g土壤樣品加入90mL蒸餾水，若將土壤樣品稀釋到107倍還需從上次稀釋液取1mL加入9mL蒸餾水逐級稀釋________次。

(2)表中各平板上均接種稀釋土壤樣品溶液0.1mL，該接種方法是________________________，為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，應(yīng)選擇上述稀釋度為________倍的平板菌落數(shù)作為統(tǒng)計(jì)結(jié)果，計(jì)算出每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為____________個。

(3)圖中鑒別培養(yǎng)基需添加____________作指示劑，產(chǎn)脲酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長一段時間后，其菌落周圍的指示劑將變成____________色。

(4)若某研究性學(xué)習(xí)小組配制圖示選擇培養(yǎng)基時，培養(yǎng)基配方如下：1.4gKH2PO4、2.1gNa2HPO4、0.2gMgSO4·7H2O、1.0g蛋白胨、10.0g葡萄糖、1.0g尿素、15.0g瓊脂，根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷，該培養(yǎng)基________(填“能”或“不能”)達(dá)到選擇培養(yǎng)的作用？原因是________________________________________________________________。

Answer 1

【答案】6 稀釋涂布平板法 106 7.3×108 酚紅 紅 不能 培養(yǎng)基中含有蛋白胨，尿素不是唯一的氮源，不能選擇出只分解以尿素為氮源的微生物

【解析】

1、鑒定分解尿素的細(xì)菌：細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)細(xì)菌，若指示劑變紅，可確定該種細(xì)菌能夠產(chǎn)生脲酶，并分解尿素。

2、微生物接種到固體培養(yǎng)基常用的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，其中稀釋涂布平板法接種可以形成單菌落，所以常用來進(jìn)行微生物的計(jì)數(shù)。

（1）取10g土壤樣品加入90mL蒸餾水，該步驟稀釋了10倍，以后是從上次稀釋液取1mL加入9mL蒸餾水中，每稀釋一次即稀釋了10倍，所以若將土壤樣品稀釋到107倍還需從上次稀釋液取1mL加入9mL蒸餾水逐級稀釋6次。
（2）根據(jù)圖中培養(yǎng)基上的菌落分布情況可知，圖中的接種方法為稀釋涂布平板法，稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)時，應(yīng)選擇平板上30-300的菌落數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)，因此應(yīng)選擇上述稀釋度為106倍的平板菌落數(shù)作為統(tǒng)計(jì)結(jié)果，計(jì)算出每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)=（78+67+74）÷3÷0.1×106=7.3×108。
（3）脲酶能夠催化尿素分解為氨，氨會使培養(yǎng)基中堿性增強(qiáng)，PH升高，使酚紅指示劑變紅色。所以圖中鑒別培養(yǎng)基需添加酚紅作指示劑，產(chǎn)脲酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長一段時間后，其菌落周圍的指示劑將變成紅色。

（4）上述培養(yǎng)基含蛋白胨，其中含有氮元素，尿素不是該培養(yǎng)基的唯一氮源，使不能合成脲酶的微生物也能在此培養(yǎng)基上生長，故不能選出只分解尿素為氮源的微生物。