Question

【題目】新型冠狀病毒和SARS病毒都會造成肺炎。下圖是SARS-CoV S蛋白特異性單克隆抗體的制備過程。回答下列問題：

（1）若只考慮細(xì)胞兩兩融合，圖中甲理論上有________________種。

（2）已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。鼠的淋巴細(xì)胞有上述兩種途徑，但一般不分裂增殖：鼠的骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖。根據(jù)該原理，在含甲的混合培養(yǎng)液中添加氨基嘌呤______________（填能或不能）篩選出A，原因是_____________________________。

（3）在 SARS-CoV S蛋白特異性單克隆抗體的制備過程中，需要用到動物細(xì)胞培養(yǎng)和動物細(xì)胞融合技術(shù)。一般來說，動物細(xì)胞培養(yǎng)需要的條件有__________________（至少答出兩點）；誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法有_________________________（至少答出兩種）。

（4） SARS-CoV S蛋白單克隆抗體______________（填能或不能）對新型冠狀病毒發(fā)揮作用，理由是__________________________________。

Answer 1

【答案】3 能 雜交瘤細(xì)胞DF途徑被氨基嘌呤阻斷后不能合成DNA，但可通過S途徑合成DNA，不斷分裂增殖 無菌、無毒環(huán)境，營養(yǎng)，溫度、PH，氣體環(huán)境 PEG、滅活的病毒、電激 不能 新型冠狀病毒與SARS病毒的抗原不同，SARS-CoVS蛋白單克隆抗體，只能與SARS-CoVS蛋白發(fā)生特異性結(jié)合

【解析】

圖示單克隆抗體的制備過程是：對小鼠注射抗原SARS-CoV S蛋白，從小鼠的脾臟中獲取經(jīng)過免疫的B細(xì)胞（即效應(yīng)B細(xì)胞），將經(jīng)過免疫的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體。誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法有：物理法（離心、振動）、化學(xué)法（聚乙二醇）、生物法（滅活的病毒）；單克隆抗體的兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）；②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群；兩次抗體檢測：專一抗體檢驗陽性。

（1）只考慮細(xì)胞兩兩融合，甲理論上有3種融合細(xì)胞，包括兩個骨髓瘤細(xì)胞融合的類型，兩個已免疫的B細(xì)胞融合的類型，一個骨髓瘤細(xì)胞與一個已免疫B細(xì)胞融合的類型。

（2）在含甲的混合培養(yǎng)液中添加氨基嘌呤后，已免疫的B細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞能利用S途徑進行DNA合成，但是無法進行分裂增殖，骨髓瘤細(xì)胞的D合成途徑被阻斷，所以骨髓瘤細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖，只有骨髓瘤細(xì)胞與已免疫的B細(xì)胞融合形成雜種細(xì)胞能利用S途徑合成DNA并進行分裂增殖從而存活下來，所以在含甲的混合培養(yǎng)液中添加氨基嘌呤能篩選出雜交瘤細(xì)胞A。

（3）動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件包括以下幾點：①無毒、無菌的環(huán)境；②營養(yǎng)物質(zhì)：無機物（無機鹽、微量元素等），有機物（糖、氨基酸、促生長因子等）；③血清和血漿 (提供細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份)；④適宜的溫度和pH等；誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法有物理誘導(dǎo)法、化學(xué)試劑誘導(dǎo)法和生物誘導(dǎo)法。

（4）抗體具有特異性，針對特定的病毒人體會產(chǎn)生相對應(yīng)的抗體，故相應(yīng)的SARS-CoVS蛋白單克隆抗體只會對SARS這種病毒起作用，不能對新型冠狀病毒發(fā)揮作用。