Question

【題目】新型冠狀病毒（2019-nCoV）肺炎疫情，對(duì)我國民生健康和經(jīng)濟(jì)造成極大影響。新型冠狀病毒相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)，對(duì)新型冠狀病毒的診斷與防控尤為重要。新型冠狀病毒的檢測(cè)最常見方法的是熒光定量RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)），RT-PCR的具體過程如圖。回答下列向題：

（1）過程Ⅰ和Ⅱ都需要加入緩沖液、原料、酶和引物等，其中加入的酶分別是_______________，________________。

（2）RT-PCR過程通過對(duì)_____________的控制影響確的活性和DNA分子結(jié)構(gòu)，從而使得整個(gè)反應(yīng)過程有序地進(jìn)行。

（3）過程Ⅱ擬對(duì)單鏈cDNA進(jìn)行n次循環(huán)的擴(kuò)增，理論上需要_______個(gè)引物B。

（4）新型冠狀病毒的檢測(cè)方法還可采用病毒抗原檢測(cè)、病毒抗體檢測(cè)，這些檢測(cè)方法的原理是_____________。檢測(cè)到新冠病毒感染者抗體滯后于病毒核酸和抗原的理由是____________________________________，因此__________檢測(cè)對(duì)傳染性極高的新型冠狀病毒（2019 - nCoV）疑似患者早期確診意義不大。

Answer 1

【答案】逆（反）轉(zhuǎn)錄酶 熱穩(wěn)定性高的DNA聚合酶（Taq酶） 溫度（或溫度、pH） 2n-1 抗原和抗體發(fā)生特異性結(jié)合 病毒進(jìn)入人體后，刺激人體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生相應(yīng)的抗體需要一段時(shí)間 病毒抗體

【解析】

1、分析圖示，過程I是由mRNA形成cDNA的過程，表示逆轉(zhuǎn)錄。過程Ⅱ先使mRNA-cDNA雜合雙鏈解開，再以單鏈的DNA合成雙鏈的DNA，最后利用RCR技術(shù)進(jìn)行DNA復(fù)制。

2、PCR技術(shù)的原理是模擬生物體內(nèi)DNA分子復(fù)制的過程，利用DNA分子熱變形原理，通過控制溫度控制控制DNA分子的解聚和結(jié)合，DNA分子體內(nèi)復(fù)制過程DNA的解旋是在解旋酶的作用下實(shí)現(xiàn)的；PCR擴(kuò)增DNA片段過程最高經(jīng)過n次擴(kuò)增，形成的DNA分子數(shù)是2n個(gè)，其中只有2條單鏈不含有引物。

（1）過程I是由mRNA形成cDNA的過程，表示逆轉(zhuǎn)錄過程，需要加入逆轉(zhuǎn)錄酶，過程Ⅱ是PCR過程，需要加入熱穩(wěn)定性高的DNA聚合酶（Taq酶）。

（2）RT-PCR過程通過對(duì)溫度的控制影響確的活性和DNA分子結(jié)構(gòu)，從而使得整個(gè)反應(yīng)過程有序地進(jìn)行。

（3）過程Ⅱ擬對(duì)單鏈cDNA進(jìn)行n次循環(huán)的擴(kuò)增，根據(jù)DNA分子半保留復(fù)制特點(diǎn)可知，該過程理論上至少需要2n-1個(gè)引物B。

（4）新型冠狀病毒的檢測(cè)方法還可采用病毒抗原-抗體檢測(cè)，其原理是抗原和抗體發(fā)生特異性結(jié)合。病毒進(jìn)入人體后，刺激人體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生相應(yīng)的抗體需要一段時(shí)間，故檢測(cè)到新冠病毒感染者抗體滯后于病毒核酸和抗原，因此病毒抗體檢測(cè)對(duì)傳染性極高的新型冠狀病毒疑似患者早期確診意義不大。