Question

【題目】心肌肌鈣蛋白（cardiac troponin，cTn）是心肌肌肉收縮的調(diào)節(jié)蛋白。cTn是由三種不同的亞基組成：心肌肌鈣蛋白T（cTnT）、心肌肌鈣蛋白I（cTnI）和肌鈣蛋白C（TnC）。其中肌鈣蛋白I（cTnI）在血液中的含量上升提示心肌損傷。為制備cTnI的單克隆抗體（簡(jiǎn)稱單抗），科研人員進(jìn)行了如下過(guò)程：

請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題。

（1）每隔兩周需用cTnI作為抗原給小鼠注射一次，共注射三次，其目的是______________________________________，最后一次注射后的第三天，取脾臟內(nèi)部分組織制成細(xì)胞懸液與骨髓細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)融合，常用的生物誘導(dǎo)因素是__________________。

（2）甲、乙、丙中，只含雜交瘤細(xì)胞的是__________________，②過(guò)程表示將乙細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板上，進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè)，之后稀釋、培養(yǎng)、再檢測(cè)，并多次重復(fù)上述操作，其目的是篩選能產(chǎn)生________________的抗cTnI單抗的雜交瘤細(xì)胞。

（3）在體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞時(shí)，培養(yǎng)液中除了要加入營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還要置于一定的氣體條件下，其中CO2的主要作用是____________________________。

Answer 1

【答案】加強(qiáng)免疫，刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多的淋巴細(xì)胞 滅活的病毒 乙和丙 特異性強(qiáng)、靈敏度高 維持培養(yǎng)液的pH

【解析】

1、單克隆抗體：由單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。具有特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可能大量制備的特點(diǎn)。
2、單克隆抗體的制備過(guò)程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞。利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，單克隆抗體制備過(guò)程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，即AB型細(xì)胞（A為B淋巴細(xì)胞，B為骨髓瘤細(xì)胞），不需要A、B、AA、BB型細(xì)胞。第二次篩選：利用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。
3、單克隆抗體的作用：①作為診斷試劑：（最廣泛的用途）具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn)。②用于治療疾病和運(yùn)載藥物：主要用于治療癌癥，可制成“生物導(dǎo)彈”。

（1）每隔兩周用cTnI作為抗原給小鼠注射一次，共注射三次，其目的是增強(qiáng)免疫，刺激小鼠產(chǎn)生更多的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合常用的生物誘導(dǎo)因素為滅活的病毒。

（2）B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)融合后，可形成三種融合細(xì)胞和兩種未融合的細(xì)胞，①過(guò)程是為了篩選獲得雜交瘤細(xì)胞，②過(guò)程表示將乙細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板上，進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè)，之后稀釋、培養(yǎng)、再檢測(cè)，并多次重復(fù)上述操作，其目的是篩選獲得能產(chǎn)生特異性強(qiáng)、靈敏度高的抗cTnI抗體的雜交瘤細(xì)胞。看圖可知：雜交瘤細(xì)胞需要對(duì)甲進(jìn)行篩選，因此乙和丙應(yīng)該是篩選得到的雜交瘤細(xì)胞。

（3）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，加入CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。