Question

【題目】人血清白蛋白(HSA)具有重要的醫(yī)用價值，只能從血漿中制備。下圖是以基因工程技術獲取重組HSA(rHSA)的兩條途徑。

（1）為獲取HSA基因，首先需采集人的血液，提取________合成總cDNA，這種方法合成的基因與人體細胞內(nèi)的基因相比,一般沒有________、啟動子、終止子等結構。

（2）將該HSA基因導入動物受精卵常用的方法是__________。啟動子是RNA聚合酶識別結合的部位，啟動子的基本組成單位為__________。

（3）利用農(nóng)桿菌轉化水稻受體細胞的過程中,需添加酚類物質，其目的_______________。該方法一般____________(填“適宜”或“不適宜”)用于將目的基因導入單子葉植物。農(nóng)桿菌中Ti質粒含有___________，稱為可轉移的DNA。

（4）檢測目的基因是否轉錄，采用_______技術。此方法用_____________探針，進而進行檢測。

（5）如果抗蟲基因導入成功，且與一條染色體的DNA整合起來，該轉基因抗蟲棉可視為雜合子，將該轉基因抗蟲棉自交，預計后代中抗蟲植株占______________。

Answer 1

【答案】mRNA 內(nèi)含子 顯微注射 脫氧（核糖）核苷酸 吸引農(nóng)桿菌移向這些細胞 不適宜 T-DNA 分子雜交 標記的目的基因 3/4

【解析】

基因工程的操作步驟：目的基因的獲�。ɑ�因文庫獲取、PCR、人工合成等）、構建基因表達載體（含目的基因、啟動子、終止子、標記基因、復制原點）、把目的基因導入受體細胞（顯微注射法、農(nóng)桿菌轉化法、鈣離子處理法）、目的基因的檢測與鑒定（DNA分子雜交法、分子雜交法、抗原-抗體雜交法）。

（1）cDNA是利用mRNA經(jīng)過反轉錄形成的DNA組成，不含啟動子、終止子和內(nèi)含子序列。

（2）將目的基因HSA導入動物細胞受精卵常用顯微注射法，啟動子是一段DNA序列，是RNA聚合酶結合的位點，啟動轉錄�；�本單位是脫氧核苷酸。

（3）把目的基因導入植物細胞常用農(nóng)桿菌轉化法，該過程中植物體受傷部位會分泌大量的酚類物質，會吸引農(nóng)桿菌向這些細胞移動，這時Ti質粒上的T-DNA可轉移至受體細胞，并整合到受體細胞的染色體DNA上。農(nóng)桿菌在自然狀態(tài)下能感染雙子葉植物和裸子植物，但對大多數(shù)單子葉植物沒有感染能力，故農(nóng)桿菌轉化法一般不用于單子葉植物。農(nóng)桿菌中Ti質粒含有T-DNA，稱為可轉移的DNA。

（4）要檢測目的基因是否轉錄，可以用標記的目的基因做探針，進行分子雜交，若出現(xiàn)雜交帶，說明成功轉錄。

（5）如果抗蟲基因導入成功，且與一條染色體的DNA整合起來，該轉基因抗蟲棉可視為雜合子（抗蟲為顯性性狀），將該轉基因抗蟲棉自交，后代中抗蟲植株：不抗蟲植物=3:1，抗蟲植物占3/4。