Question

【題目】隨著“人——鼠”雜種細(xì)胞的分裂，細(xì)胞中來自人的染色體會隨機(jī)丟失，在最終穩(wěn)定時(shí)，雜種細(xì)胞只保留了人的一條或幾條染色體。利用此特性，可將某些基因定位于特定的染色體上。

I．將人小鼠細(xì)胞融合時(shí)，常用_______或聚乙二醇促進(jìn)融合，細(xì)胞融合過程體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有_____________。

II．基因T控制合成的酶能利用胸腺脫氧核苷、基因H控制合成的酶能利用次黃嘌呤。不能同時(shí)利用這兩類物質(zhì)的細(xì)胞不能成活。將基因型為ttHH人細(xì)胞懸液和基因型為TThh鼠細(xì)胞懸液混合，誘導(dǎo)細(xì)胞融合，后置于添加有胸腺脫氧核苷和次黃嘌呤的HAT培養(yǎng)基中。

（1）HAT培養(yǎng)基按功能分屬于_____________。

（2）細(xì)胞的融合率很低，若細(xì)胞只能兩兩融合。在HAT培養(yǎng)基存活細(xì)胞的基因型為_____________，判斷依據(jù)是_____________。

（3）鏡檢分析HAT培養(yǎng)基中處于分裂中期的雜種細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)殘留的人染色體如下表：

①編號為1的雜種細(xì)胞的基因型為____________。

②從表中數(shù)據(jù)分析，可將基因_________定位于_________染色體上，依據(jù)是______________。

③若將另一對等位基因也在人人身體上定位，理論上，可選擇基因型分別為_________、_________的人、鼠細(xì)胞進(jìn)行融合。

Answer 1

【答案】

（1）滅活病毒（仙臺病毒） 流動性

（2）①選擇培養(yǎng)基 ②TTttHHhh 細(xì)胞能同時(shí)利用胸腺脫氧核苷和次黃嘌呤

（3）① TTTTHHhhhh或TTTTttHHhhhh ② H（h） 17 存活細(xì)胞內(nèi)均含人第17（17號）染色體

③TThh ttHH

【解析】I．將人小鼠細(xì)胞融合時(shí)，常用滅活病毒（仙臺病毒）或聚乙二醇促進(jìn)融合，細(xì)胞融合過程體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有流動性。

II．基因T控制合成的酶能利用胸腺脫氧核苷、基因H控制合成的酶能利用次黃嘌呤，將基因型為ttHH人細(xì)胞懸液和基因型為TThh鼠細(xì)胞懸液混合，誘導(dǎo)細(xì)胞融合，后置于添加有胸腺脫氧核苷和次黃嘌呤的HAT培養(yǎng)基中。

（1）根據(jù)題意，不能同時(shí)利用胸腺脫氧核苷和次黃嘌呤的細(xì)胞不能成活，故HAT培養(yǎng)基按功能分屬于選擇培養(yǎng)基，可將能同時(shí)利用胸腺脫氧核苷和次黃嘌呤的雜種細(xì)胞選擇出來。

（2）融合后雜種細(xì)胞的基因型為融合前兩細(xì)胞基因型直接累加，由于細(xì)胞的融合率很低，且不能同時(shí)利用胸腺脫氧核苷和次黃嘌呤的細(xì)胞不能成活，若細(xì)胞只能兩兩融合，在HAT培養(yǎng)基存活細(xì)胞的基因型為TTttHHhh。

（3）①編號為1的雜種細(xì)胞保留了人的X染色體和17號染色體，兩兩融合后的細(xì)胞基因型會有TTttHHhh或TTTThhhh或ttttHHHH三種，由于基因T控制合成的酶能利用胸腺脫氧核苷、基因H控制合成的酶能利用次黃嘌呤，同時(shí)利用胸腺脫氧核苷和次黃嘌呤的細(xì)胞才能在培養(yǎng)基中存活并增殖，故在該培養(yǎng)基中能存活的細(xì)胞基因型為TTttHHhh，其分裂前期的基因型為TTTTttttHHHHhhhh；又因?yàn)殡s種細(xì)胞的分裂，細(xì)胞中來自人的染色體會隨機(jī)丟失，即該細(xì)胞分裂前期可能丟失t基因也可能丟失H基因，且存活的細(xì)胞內(nèi)H基因不會全部丟失，否則不能利用培養(yǎng)基中的次黃嘌呤維持細(xì)胞生命，所以該培養(yǎng)基中處于分裂中期的細(xì)胞基因型為TTTTHHhhhh或TTTTttHHhhhh。

②分析表中數(shù)據(jù)可知，培養(yǎng)基中存活的各種雜種細(xì)胞都保留了17號染色體，結(jié)合上面的分析，該培養(yǎng)基中處于分裂中期的細(xì)胞都含有H基因，故可將基因H（h）定位于17號染色體上。

③若將另一對等位基因也在人人身體上定位，根據(jù)上述分析，可選擇基因型分別為TThh、ttHH的人、鼠細(xì)胞進(jìn)行融合。