【題目】下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點,圖l、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。下列說法錯誤的是 ( )

A. 一個圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaⅠ切割后,含有4個游離的磷酸基團

B. 用圖1中的質(zhì)粒和圖2中的目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒,不能使用SmaⅠ切割

C. 2中為防止酶切后單個含目的基因的DNA片段自身連接成環(huán)狀,不能使用EcoRⅠ

D. 為了獲取重組質(zhì)粒,最好用BamHⅠHindⅢ同時切割質(zhì)粒和外源DNA

【答案】A

【解析】

試題A、質(zhì)粒切割前是雙鏈環(huán)狀DNA分子,所有磷酸基團參與形成磷酸二酯鍵,故不含游離的磷酸基團.從圖1可以看出,質(zhì)粒上只含有一個SmaⅠ的切點,因此被該酶切割后,質(zhì)粒變?yōu)榫性雙鏈DNA分子,因每條鏈上含有一個游離的磷酸基團,因此切割后含有兩個游離的磷酸基團,A錯誤;

B、基因表達載體必須具備目的基因、啟動子、終止子、標記基因,圖中質(zhì)粒的標記基因為抗生素抗性基因,而Sma I的切割位點就在該基因上,因此用質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒,不能使用Sma I切割,B正確;

C、由于同種限制酶切割形成的黏性末端相同,圖2中為防止酶切后單個含目的基因的DNA片段自身連接成環(huán)狀,不能使用EcoRⅠ,C正確;

D、使用BamHⅠHindⅢ兩種限制酶同時處理質(zhì)粒、外源DNA,各自會有不同黏性末端,能防止自身環(huán)化,D正確.

故選:A

練習(xí)冊系列答案
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A. 細胞吸收M需載體蛋白的參與

B. 細胞吸收M的方式為自由擴散

C. 細胞吸收M的方式為主動轉(zhuǎn)運

D. M可能是K+

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(1)將S基因轉(zhuǎn)入蚊子體內(nèi),使蚊子的唾液腺細胞大量表達S蛋白,該蛋白可以抑制登革熱病毒的復(fù)制。為了獲得轉(zhuǎn)基因蚊子,需要將攜帶S基因的載體導(dǎo)入蚊子的受精卵細胞。如果轉(zhuǎn)基因成功,在轉(zhuǎn)基因蚊子體內(nèi)可檢測出_______________。

(2)科學(xué)家獲得一種顯性突變蚊子(AABB)。A、B基因位于非同源染色體上,只有A或B一種顯性基因的胚胎致死。若純合的雄蚊(AABB)與野生型雌蚊(aabb)交配,F(xiàn)1群體中A基因頻率是_____,F(xiàn)2群體中A基因頻率是_____。

(3)將S基因分別插入到A、B基因的緊鄰位置(如圖),將該純合的轉(zhuǎn)基因雄蚊釋放到野生群體中,群體中蚊子體內(nèi)病毒的平均數(shù)目會逐代_____,原因是_____。

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【題目】某一質(zhì)粒載體如圖所示,外源DNA插入到AmprTetr中會導(dǎo)致相應(yīng)的基因失活(Ampr表示氨芐青霉素抗性基因,Tetr表示四環(huán)素抗性基因)。有人將此質(zhì)粒載體用BamH I酶切后,與用BamH I酶切獲得的目的基因混合,加入DNA連接酶進行連接反應(yīng),用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌,結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化,有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種,分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質(zhì)粒載體、含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌;卮鹣铝袉栴}:

1)質(zhì)粒載體作為基因工程的工具,應(yīng)具備的基本條件有______________(答出兩點即可)。

而作為基因表達載體,除滿足上述基本條件外,還需具有啟動子和終止子。

2)如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進行篩選,在上述四種大腸桿菌細胞中,未被轉(zhuǎn)化的和僅含有環(huán)狀目的基因的細胞是不能區(qū)分的,其原因是______________;并且____________________________的細胞也是不能區(qū)分的,其原因是_____________。在上述篩選的基礎(chǔ)上,若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌的單菌落,還需使用含有_____________的固體培養(yǎng)基。

3)基因工程中,某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體,其DNA復(fù)制所需的原料來自于_____________

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