【題目】白細(xì)胞介素是人體重要的淋巴因子，具有免疫調(diào)節(jié)、抑制腫瘤等多種功能。近年來科學(xué)家將藥用蛋白轉(zhuǎn)向植物生產(chǎn)，如圖是將人的白細(xì)胞介素基因?qū)腭R鈴薯中，培養(yǎng)生產(chǎn)白細(xì)胞介素的過程。（tsr為一種抗生素—硫鏈絲菌素的抗性基因）

（1）提取人的白細(xì)胞介素基因適宜選用的限制酶是___________，不能使用限制酶SmaI的原因是___________。

（2）除圖示方法外，也可從利用___________法構(gòu)建的cDNA文庫(kù)中獲取目的基因。獲得目的基因后可采用PCR技術(shù)大量擴(kuò)增，需提供Taq酶和___________等。

（3）將目的基因?qū)腭R鈴薯細(xì)胞常采用___________法，其原理是將目的基因?qū)?/span>Ti質(zhì)粒上的___________。

（4）為篩選出含目的基因的馬鈴薯細(xì)胞，需要在培養(yǎng)基中添加___________。最終為了檢測(cè)目的基因是否在馬鈴薯中表達(dá)，可通過____________方法進(jìn)行分子水平的檢測(cè)。

【答案】PstⅠ和HindⅢ 限制酶SmaⅠ酶切位點(diǎn)位于白細(xì)胞介素基因中部，使用它會(huì)造成目的基因斷裂 反轉(zhuǎn)錄 引物 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 T-DNA 硫鏈絲菌素 抗原—抗體雜交

【解析】

分析題圖，圖示表示人的白細(xì)胞介素基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，載體和目的基因都有限制酶PstⅠ和HindⅢ的切割位點(diǎn)，所以切割載體和目的基因時(shí)用限制酶PstⅠ和HindⅢ，再用DNA連接酶連接目的基因和運(yùn)載體形成重組載體。獲取目的基因的方法包括從基因文庫(kù)中獲取、cDNA文庫(kù)法、供體細(xì)胞的DNA中直接分離基因（鳥槍法）。農(nóng)桿菌通過侵染植物傷口進(jìn)入細(xì)胞后，可將Ti質(zhì)粒的T-DNA插入到植物基因組中。

（1）載體和目的基因都有限制酶PstⅠ和HindⅢ的切割位點(diǎn)，使用限制酶SmaI則會(huì)破壞目的基因；

（2）目的基因的獲取可以采用cDNA文庫(kù)法（即逆轉(zhuǎn)錄法），指以某生物成熟mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄而成的cDNA序列的重組DNA群體，采用PCR技術(shù)大量擴(kuò)增，需提供Taq酶和引物等；

（3）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，利用的是Ti質(zhì)粒上的T-DNA；

（4）構(gòu)建好的表達(dá)載體含有硫鏈絲菌素的抗性基因，因此可以在培養(yǎng)基中添加硫鏈絲菌素進(jìn)行篩選，為檢測(cè)目的基因是否順利表達(dá)，可以通過抗原-抗體雜交技術(shù)。

練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】如圖表示某綠色植物的葉肉細(xì)胞在其他條件不變且比較適宜時(shí)，分別在光照強(qiáng)度為 a、b、c、d 時(shí)，單位時(shí)間內(nèi)CO2 釋放量和 O2 產(chǎn)生量的變化。下列敘述正確的是

A.光照強(qiáng)度為 a 時(shí)，葉肉細(xì)胞產(chǎn)生［H］的場(chǎng)所有葉綠體、線粒體、細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)

B.光照強(qiáng)度為 b 時(shí)，葉肉細(xì)胞呼吸速率為 3

C.光照強(qiáng)度為 c 時(shí)，光合作用速率大于呼吸速率

D.光照強(qiáng)度為 d 時(shí)，葉肉細(xì)胞光合作用需要的二氧化碳來自自身呼吸產(chǎn)生的和從外界環(huán)境中吸收的

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】回答下列有關(guān)生物技術(shù)實(shí)踐的相關(guān)問題

Ⅰ．生物柴油是一種可再生的清潔能源，其應(yīng)用在一定程度上能夠減緩人類對(duì)化學(xué)燃料的消耗�？茖W(xué)家發(fā)現(xiàn)，在微生物M產(chǎn)生的脂肪酶作用下，植物油與甲醇反應(yīng)能夠合成生物柴油（如圖）。

（1）用于生產(chǎn)生物柴油的植物油不易揮發(fā)，宜選用__________、__________等方法從油料作物中提取。

Ⅱ．三七是一種名貴中藥，其有效成分是三七皂苷，可用萃取法提取。

（2）為了提高提取率，提取前應(yīng)對(duì)三七材料進(jìn)行預(yù)處理，即對(duì)其進(jìn)行__________。采用萃取法提取某有效成分時(shí)需要加熱，一般不用酒精燈直接加熱而用水浴加熱，因?yàn)?/span>__________。

（3）工業(yè)化大量而快速生產(chǎn)三七以提取相關(guān)成分，可應(yīng)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，此過程會(huì)使用到生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素等植物激素，對(duì)形成的愈傷組織應(yīng)當(dāng)測(cè)定其__________的含量。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】在一個(gè)蜂群中，少數(shù)幼蟲一直取食蜂王漿而發(fā)育成蜂王，而大多數(shù)幼蟲以花粉和花蜜為食將發(fā)育成工蜂。DNMT3蛋白是DNMT3基因表達(dá)的一種DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶，能使DNA某些區(qū)域添加甲基基團(tuán)（如下圖所示）。敲除DNMT3基因后，蜜蜂幼蟲將發(fā)育成蜂王，這與取食蜂王漿有相同的效果。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）

A.被甲基化的DNA片段中遺傳信息發(fā)生改變，從而使生物的性狀發(fā)生改變

B.蜂群中蜜蜂幼蟲發(fā)育成蜂王可能與體內(nèi)重要基因是否甲基化有關(guān)

C.DNA甲基化后可能干擾了RNA聚合酶等對(duì)DNA部分區(qū)域的識(shí)別和結(jié)合

D.胞嘧啶和5′甲基胞嘧啶在DNA分子中都可以與鳥嘌呤配對(duì)

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】黑茶常被壓縮為茯磚茶，其內(nèi)的金黃色菌落俗稱“金花”，主要是冠突散囊菌，其內(nèi)含豐富的營(yíng)養(yǎng)素，對(duì)人體極為有益�；卮鹣铝袉栴}：

（1）為分離茯磚茶中的冠突散囊菌，制備馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基→無(wú)菌水浸泡黑茶30min過濾獲得菌液→取0．2mL稀釋液接種在培養(yǎng)基平板上，在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間觀察菌落形態(tài)并計(jì)數(shù)。由培養(yǎng)基的配方可知，冠突散囊菌屬于______________（填“細(xì)菌”、“真菌”或“放線菌”）。若采用稀釋涂布平板法，應(yīng)先做系列稀釋再涂布培養(yǎng)，確保以10倍等梯度稀釋的操作是每次均從上一個(gè)稀釋倍數(shù)的試管中取1mL菌液，再加入______________中進(jìn)行稀釋，移液管使用過程中的無(wú)菌操作有______________（答出兩點(diǎn)即可）。

（2）冠突散囊菌能分泌淀粉酶催化茶葉中的淀粉轉(zhuǎn)化低聚糖，也能分泌氧化酶催化多酚類化合物氧化，使茶葉湯色變棕紅，消除粗青味。酶催化作用的機(jī)理是_______________；欲將多種相對(duì)分子質(zhì)量不同的酶進(jìn)行分離，可用______________法；淀粉酶適合采用______________法固定化技術(shù)生產(chǎn)麥芽糖漿；若要模擬冠突散囊菌分解茶湯中的成分，應(yīng)該采用固定化細(xì)胞技術(shù)而非固定化酶，理由是固定化細(xì)胞能____________，使冠突散囊菌能發(fā)生連續(xù)的酶反應(yīng)，分解茶湯中的成分。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】下圖甲、乙為某哺乳動(dòng)物處于不同分裂時(shí)期的細(xì)胞圖，丙圖為該動(dòng)物細(xì)胞分裂時(shí)相關(guān)物質(zhì)或結(jié)構(gòu)數(shù)量變化的部分曲線圖。下列有關(guān)敘述正確的是（ ）

A.甲圖細(xì)胞含有兩個(gè)四分體，其中發(fā)生的變異是由基因突變導(dǎo)致的

B.乙細(xì)胞名稱為次級(jí)精母細(xì)胞，分裂后形成子細(xì)胞的基因型是AB或aB

C.丙圖中曲線變化可表示減數(shù)分裂某段時(shí)期染色單體數(shù)的變化

D.若丙圖中曲線表示睪丸中某細(xì)胞分裂時(shí)染色體組的數(shù)目變化，則a值為1或2

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】假設(shè)DNA復(fù)制方式有三種：半保留復(fù)制、全保留復(fù)制和分散復(fù)制，復(fù)制過程如圖所示。若將蠶豆根尖細(xì)胞放在含3H的脫氧核苷酸的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，完成一個(gè)細(xì)胞周期，然后在不含放射性標(biāo)記的培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)一個(gè)細(xì)胞周期，下列說法正確的是（ ）

A.若復(fù)制方式是半保留復(fù)制，則第二次分裂前期，每條染色體上有2條核苷酸鏈有放射性

B.若復(fù)制方式是分散復(fù)制，則完成兩個(gè)細(xì)胞周期后，有兩個(gè)細(xì)胞有放射性標(biāo)記

C.若復(fù)制方式是全保留復(fù)制，則第一次分裂結(jié)束后每個(gè)子代細(xì)胞中有一半染色體帶放射性

D.根據(jù)本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果可判斷出DNA復(fù)制的具體方式

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】培養(yǎng)胡蘿卜根組織可獲得試管苗，獲得試管苗的過程如圖所示。

回答下列問題。

（1）利用胡蘿卜根段進(jìn)行組織培養(yǎng)可以形成試管苗。用分化的植物細(xì)胞可以培養(yǎng)成完整的植株，這是因?yàn)橹参锛?xì)胞具有__________。

（2）步驟③切取的組織塊中要帶有形成層，原因是____________。

（3）從步驟⑤到步驟⑥需要更換新的培養(yǎng)基，其原因是____________。在新的培養(yǎng)基上愈傷組織通過細(xì)胞的____________過程，最終可形成試管苗。

（4）步驟⑥要進(jìn)行照光培養(yǎng)，其作用是____________。

（5）經(jīng)組織培養(yǎng)得到的植株，一般可保持原品種的__________，這種繁殖方式屬于____________繁殖。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】Ⅰ胰島素是動(dòng)物體內(nèi)調(diào)節(jié)血糖的一種重要的激素。正常人進(jìn)食后血糖濃度上升，胰島素分泌增多。胰島素可_______血液中葡萄糖的吸收、引起合成糖原，并抑制_________及非糖物質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)槠咸烟牵和瑫r(shí)胰島 α 細(xì)胞分泌_____________受抑制，使血糖濃度下降。

Ⅱ除了降低血糖時(shí)會(huì)使用胰島素外，還會(huì)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中加入胰島素。為了探究胰島素對(duì)提高細(xì)胞克隆形成率的作用，研究者提出了以下實(shí)驗(yàn)思路。請(qǐng)根據(jù)以下提供的實(shí)驗(yàn)材料，完善實(shí)驗(yàn)思路，并預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

實(shí)驗(yàn)材料：卡氏瓶、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液、小鼠血管平滑肌細(xì)胞、葡萄糖測(cè)定儀、顯微鏡、

血細(xì)胞計(jì)數(shù)板、生理鹽水、一定濃度的胰島素溶液等。（說明：實(shí)驗(yàn)所用小鼠血管平滑肌細(xì)胞是經(jīng)傳代培養(yǎng)的能增殖的細(xì)胞。）

實(shí)驗(yàn)思路：

①取卡氏瓶若干個(gè)，分組如下：

甲組：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液＋小鼠血管平滑肌細(xì)胞＋生理鹽水；

乙組：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液＋小鼠血管平滑肌細(xì)胞＋_________________________。

每組設(shè)置若干個(gè)重復(fù)樣品。

②____________________________________________________。

③測(cè)定培養(yǎng)液中的葡萄糖濃度和細(xì)胞數(shù)目，求每組平均值并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

請(qǐng)回答：

（1）完善實(shí)驗(yàn)思路中的空格。

（2）實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖?/span>____________________。

（3）在使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板時(shí)，壓在方格線上的細(xì)胞只計(jì)__________________上的細(xì)胞數(shù)。

（4）若胰島素對(duì)上述變量均發(fā)揮效應(yīng)，請(qǐng)預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果 （在以下坐標(biāo)系中用柱形圖表示葡萄糖濃度和細(xì)胞數(shù)目變化）：

___________

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