Question

9．(14分)噬菌體有極強的侵染能力，能在細菌中快速進行DNA復制，產(chǎn)生子代噬菌體，最終導致細菌破裂(稱為溶菌狀態(tài))；或者整合到細菌基因組中潛伏起來，不產(chǎn)生子代噬菌體(稱為溶原狀態(tài))。在轉(zhuǎn)基因技術中常用噬菌體構(gòu)建基因克隆載體，使其在受體細菌中大量擴增外源DNA，以備研究使用。相關操作如下圖所示，請回答。

    (1)組裝噬菌體時，可被噬菌體蛋白質(zhì)包裝的DNA長度約為36～51 kb，則經(jīng)人工改造的gtl0載體可插入的外源DNA的最大長度為        kb。人工改造載體時，為獲得較大的插入能力，可刪除噬菌體DNA組成中的         序列以縮短其長度。

(2)噬菌體DNA上通常沒有適合的標記基因，因此人工改造時需加裝適合的標記基因，如上圖gtl0載體中的imm434基因。該基因編碼一種阻止噬菌體進入溶菌狀態(tài)的阻遏物。構(gòu)建基囚克隆載體需用到的酶是        ，外源DNA的插入位置應位于imm434基因           (之中／之外)，使經(jīng)侵染培養(yǎng)后的受體菌處于          狀態(tài)。

    (3)蛋白質(zhì)與DNA相比，特有的化學元素是        ，若用放射性同位素標記該元素，再用被標記的噬菌體侵染未被標記的細菌，短時保溫后攪拌、離心，可檢測到放射性物質(zhì)主要分布在試管            部分。

Answer 1

【答案】(1)7.6     控制溶原生長(或中部)     (2)限制酶和DNA連接酶    之中    溶菌    (3)S    上清液

【解析】考查基因工程的相關知識、蛋白質(zhì)與DNA的比較等知識、同位素標記法。

(1)根據(jù)題意分析組裝噬菌體時，可插入的外源DNA的最大長度為51-43.4=7.6kb。為獲得較大的插入能力，人工改造載體時，可刪除噬菌體DNA組成中的中部序列以縮短其長度。

(2)構(gòu)建基因克隆載體需用到的酶是限制酶和DNA連接酶，外源DNA的插入位置應位于im434基因之中，使經(jīng)侵染培養(yǎng)后的受體菌處于溶菌狀態(tài)。

(3)蛋白質(zhì)與DNA相比，特有的化學元素是S，若用放射性同位素標記該元素，再用被標記的噬菌體侵染未被標記的細菌，短時保溫后攪拌、離心，可檢測到放射性物質(zhì)主要分布在試管上清液中。