Question

【題目】如圖所示，質(zhì)粒PBR322上含有青霉素抗性基因（XR）和四環(huán)素抗性基因（YR）．其中，XR內(nèi)部含有限制酶KasI識(shí)別序列，YR內(nèi)部含有限制酶FseI、HpaII、NaeI、NgoMIV識(shí)別序列，且這些識(shí)別序列在整個(gè)質(zhì)粒上均僅有一處，目的基因內(nèi)部不存在這些識(shí)別序列．

（1）質(zhì)粒PBR322的本質(zhì)是_____。FseI、HpaII、NaeI、NgoMIV中限制酶的作用特點(diǎn)是_____．

（2）NaeI酶切目的基因和質(zhì)粒，加入DNA連接酶連接后，進(jìn)行大腸桿菌受體細(xì)胞導(dǎo)入操作。之后，受體細(xì)胞的類(lèi)型包含_____

A．抗青霉素、抗四環(huán)素 B．抗青霉素、不抗四環(huán)素

C．不抗青霉素、抗四環(huán)素 D．不抗青霉素、不抗四環(huán)素

（3）若用KasI和FseI聯(lián)合酶切上述重組質(zhì)粒，則可能產(chǎn)生的酶切片段數(shù)_____。

A.2 B．3 C．4 D．5

（4）動(dòng)物基因工程通常以受精卵作為受體細(xì)胞的根本原因是_____。

A．受精卵能使目的基因高效表達(dá)B．受精卵可發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體

C．受精卵基因組更易接受DNA的插入D．受精卵尺寸較大，便于DNA導(dǎo)入操作

（5）若目的基因模板鏈中的TGA序列對(duì)應(yīng)1個(gè)密碼子，翻譯時(shí)識(shí)別該密碼子的tRNA上相應(yīng)的堿基序列是_____．通過(guò)篩選出的受體細(xì)胞內(nèi)，目的基因能成功表達(dá)的原因是_____。

Answer 1

【答案】閉環(huán)雙鏈DNA 識(shí)別DNA特定的序列并在特定位點(diǎn)切割 ABD A B UGA 生物界共用一套遺傳密碼子

【解析】

分析題圖：質(zhì)粒PBR322上含有青霉素抗性基因（XR）和四環(huán)素抗性基因（YR），其中XR內(nèi)部含有限制酶KasⅠ識(shí)別序列，YR內(nèi)部含有限制酶FseⅠ、HpaⅡ、NaeⅠ、NgoMⅣ識(shí)別序列，五種酶的識(shí)別序列在整個(gè)質(zhì)粒上均僅有一處，目的基因內(nèi)部不存在這些識(shí)別序列。由于限制酶具有特異性，因此用KasⅠ和FseⅠ聯(lián)合酶切重組質(zhì)粒，KasⅠ在XR可以切開(kāi)一個(gè)位點(diǎn)，FseⅠ在YR也可以切開(kāi)一個(gè)位點(diǎn)，這樣只能得到2段DNA片段。

（1）質(zhì)粒的本質(zhì)是雙鏈環(huán)狀DNA分子．由于限制酶具有特異性，只能識(shí)別DNA特定的序列并在特定位點(diǎn)切割。
（2）將圖中切開(kāi)的質(zhì)粒與目的基因溶液混合，加入DNA連接酶連接后，可能有以下三種情況：
①質(zhì)粒自身環(huán)化或質(zhì)粒與質(zhì)粒結(jié)合，將它們導(dǎo)入受體細(xì)胞后，由于XR、YR基因都沒(méi)有被破壞，因此表現(xiàn)為XR、YR，A正確；
②有的質(zhì)粒與目的基因連接形成重組質(zhì)粒，這種重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞后，由于YR基因被破壞，只有XR抗性，表現(xiàn)為XR、YS，B正確；
③目的基因自身環(huán)化或目的基因與目的基因結(jié)合，將它們導(dǎo)入受體細(xì)胞后，由于沒(méi)有抗性基因，因此表現(xiàn)為XS、YS，D正確。
故選：ABD。
（3）根據(jù)題意，XR內(nèi)部含有限制酶KasⅠ識(shí)別序列，YR內(nèi)部含有限制酶FseⅠ、HpaⅡ、NaeⅠ、NgoMⅣ識(shí)別序列，五種酶的識(shí)別序列在整個(gè)質(zhì)粒上均僅有一處，目的基因內(nèi)部不存在這些識(shí)別序列。因此用KasⅠ和FseⅠ聯(lián)合酶切重組質(zhì)粒，KasⅠ在XR可以切開(kāi)一個(gè)位點(diǎn)，FseⅠ在YR也可以切開(kāi)一個(gè)位點(diǎn)，這樣只能得到2段DNA片段，故選A。
（4）因?yàn)槭芫�卵的全能性高，可以發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體，因此，動(dòng)物基因工程通常以受精卵作為受體細(xì)胞。故選：B。
（5）根據(jù)堿基配對(duì)原則，TGA序列對(duì)應(yīng)的密碼子是ACU，密碼子ACU對(duì)應(yīng)的tRNA上的反密碼子是UGA。所有的生物都共用一套密碼子，所以目的基因能成功表達(dá)。