Question

【題目】已知細胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷．人淋巴細胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖．鼠骨髓瘤細胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖．將這兩種細胞在培養(yǎng)皿中混合，加促融劑促進細胞融合，獲得雜種細胞，并生產(chǎn)單克隆抗體．請回答下列有關(guān)問題：
（1）生產(chǎn)單克隆抗體時，一般不直接利用效應B淋巴細胞，主要原因是 ．
（2）①過程中，常用的與植物細胞融合相同的誘導劑是 ．
（3）②過程為培養(yǎng)，培養(yǎng)液中還需通入氣體物質(zhì)，其中通入CO2的目的是 ．
（4）④表示雜交瘤細胞的擴大培養(yǎng)，其既可在體外培養(yǎng)，也可注射到小鼠內(nèi)培養(yǎng)．體內(nèi)培養(yǎng)與體外培養(yǎng)相比，其優(yōu)點是 ．
（5）為了從培養(yǎng)液中分離出雜交瘤細胞，需在③過程向培養(yǎng)液中加入 ， 理由是雜交瘤細胞可利用途徑合成DNA，從而才能在該培養(yǎng)液中增殖．

Answer 1

【答案】
（1）B淋巴細胞不能無限增殖
（2）聚乙二醇
（3）細胞；維持培養(yǎng)液的pH
（4）腹腔；無需再提供營養(yǎng)物質(zhì)以及無菌環(huán)境，操作簡便
（5）氨基嘌呤；淋巴細胞中的S
【解析】解：（1）B淋巴細胞不能無限增殖，故生產(chǎn)單克隆抗體時，一般不直接利用一個B淋巴細胞．（2）①誘導動物細胞融合，常用的與植物細胞融合相同的誘導劑是聚乙二醇．（3）②過程為細胞培養(yǎng)，培養(yǎng)液中還需通入氣體，其中通入CO2的目的主要是維持培養(yǎng)液的pH．（4）④表示雜交瘤細胞的擴大培養(yǎng)，其既可在體外培養(yǎng)，也可注射到小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)．體內(nèi)培養(yǎng)與體外培養(yǎng)相比，其優(yōu)點是無需再提供營養(yǎng)物質(zhì)以及無菌環(huán)境，操作簡便．（5）在培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，培養(yǎng)后收集增殖細胞．加入氨基嘌呤后，使D合成途徑阻斷，僅有D全合成途徑的骨髓細胞及其彼此融合的細胞就不能增殖，淋巴細胞一般不分裂增殖．因此培養(yǎng)液中加入該物質(zhì)后，不能生長的細胞有骨髓瘤細胞、融合的淋巴細胞、融合的骨髓瘤細胞、淋巴細胞．人淋巴細胞和骨髓癌細胞融合后的雜種細胞中可以利用淋巴細胞中的S途徑合成DNA而增殖． 所以答案是：（1）B淋巴細胞不能無限增殖；（2）聚乙二醇；（3）細胞；維持培養(yǎng)液的pH；（4）腹腔；無需再提供營養(yǎng)物質(zhì)以及無菌環(huán)境，操作簡便；（5）氨基嘌呤；淋巴細胞中的S
【考點精析】解答此題的關(guān)鍵在于理解單克隆抗體的制備的相關(guān)知識，掌握對免疫小鼠注射特定的抗原蛋白；提取B淋巴細胞；同時用動物細胞培養(yǎng)的方法培養(yǎng)骨髓瘤細胞并提��；促使它們細胞融合；在特定的選擇培養(yǎng)基上篩選出融合的雜種細胞；然后對它進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測；最后將雜交瘤細胞在體外做大規(guī)模培養(yǎng)或注射入小鼠腹腔內(nèi)增殖，從細胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中可得到大量的單克隆抗體．