Question

科學家將人的生長激素基因與大腸桿菌的DNA分子進行重組，并成功地在大腸桿菌中得以表達。但在進行基因工程的操作過程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和質粒，便于重組和篩選。已知限制酶I的識別序列和切點是—G^↓GATCC— ，限制酶II的識別序列和切點是—^↓GATC—，據(jù)圖回答：

（1）過程①表示的是采取___________________的方法來獲取目的基因。

（2）根據(jù)圖示分析，在構建基因表達載體過程中，應用限制酶_________（填“I”或“II”）切割目的基因。用限制酶切割目的基因和運載體后形成的黏性末端通過_____________原則進行連接。

（3）人的基因之所以能與大腸桿菌的DNA分子進行重組，原因是____________________。

（4）人體的生長激素基因能在細菌體內成功表達是因為__________________________。

（5）將得到的大腸桿菌B涂布在一個含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，待平板冷凝后要將平板倒置，其意義是__________________________________________。經過一定時間培養(yǎng)后，能夠在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長的，說明已導入了_______________，反之則沒有導入。

Answer 1

（1） 反轉錄法（人工合成法）

（2） Ⅱ  ；   堿基互補配對

（3）人的基因與大腸桿菌DNA的雙螺旋結構相同

（4）共用一套（遺傳）密碼子

（5）防止皿蓋冷卻水倒流入培養(yǎng)基（合理即可得分）；  普通質�；蛑亟M質粒（缺一不給分）

解析:

（1）由課本知目的基因的兩條途徑是：①將從細胞中提取分離出的以目的基因為模板轉錄為成的 ；②據(jù)蛋白質中氨基酸序列 mRNA中堿基序列 DNA堿基序列 目的基因。過程①是由mNA來合成DNA（目的基因），是人工合成目的基因的反轉錄法。

（2）由圖中重組質粒的信息知，目的基因插入在四環(huán)素的抗性基因中，用到限制酶因該是切割四環(huán)素的抗性基因，因此應用限制酶II的識別序列和切點是—^↓GATC—。用同種限制酶切割目的基因和運載體后形成的黏性末端的堿基通過堿基互補配對原則形成氫鍵 連接。

（3） 人的基因之所以能與大腸桿菌的DNA分子進行重組，因為DNA結構都一樣，都是由四種脫氧核苷酸構成的雙螺旋結構。

（4） 所有生物都共用一套密碼子表，只要條件適宜都可以轉錄翻譯進行表達過程。所以人體的生長激素基因也能在細菌體內成功表達。

（5）沒有冷凝，培養(yǎng)基還不是液態(tài)，沒有形成固態(tài)。這樣就把培養(yǎng)皿平板倒置，會使皿蓋冷卻水倒流入培養(yǎng)基中。能夠在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長的就說明目的基因導入位置不在抗氨芐青霉素基因中間，沒有破壞抗氨芐青霉素基因，或者是普通的質粒沒有導入成功，兩個抗性基因都沒被破壞。