Question

【題目】希爾反應(yīng)是測定葉綠體活力的常用方法。希爾反應(yīng)基本原理：光照下，葉綠體釋放O2，同時氧化型DCIP（2，6一二氯酚靛酚）被還原，顏色由藍色變成無色。DCIP顏色變化引起的吸光率變化可反映葉綠體活力。研究小組利用菠菜葉進行了葉綠體活力的測定實驗�；卮鹣铝袉栴}：

（1）制備葉綠體懸液：選取10g新鮮的菠菜葉加入研缽，研磨前加入適量的0．35mol/LNaCI溶液和pH7．8的酸堿緩沖液等；研磨成勻漿后，用紗布過濾，取濾液進行_____，分離得到葉綠體；將葉綠體置于______溶液中，以保證葉綠體的正常形態(tài)，獲得葉綠體懸液。

（2）測定葉綠體活力：分組如下，并按下表加入試劑；測定各組吸光率。

試管號	磷酸緩 沖液(mL)	葉綠體 懸液(mL)	煮沸(min)	DCIP(mL)
1	9.4	0.1	－	0.5
2	9.4	0.1	5	0.5
3	9.9	0.1	－	－

注：“一”表示不處理或不加入。

①希爾反應(yīng)模擬了光合作用中_____階段的部分變化，該階段在葉綠體的_____中進行。氧化型DCIP在希爾反應(yīng)中的作用，相當于_____在該階段中的作用。

②煮沸處理后，需向2號試管中加入一定量的_____，以保證各試管中液體的量相等。

③3號試管的作用是_____。

Answer 1

【答案】離心 0．35mol/LNaCl（或等滲） 光反應(yīng) 類囊體膜 NADP+ 蒸餾水 測定該濃度葉綠體懸液自身的吸光率作為對照

【解析】

光合作用由光反應(yīng)和反應(yīng)兩階段構(gòu)成，希爾反應(yīng)活力測定的基本原理是將葉綠體加入DCIP（二氯酚靛酚）溶液并照光，水在光照下被分解，產(chǎn)生氧氣等，因此模擬的是光反應(yīng)階段；氧化劑DCIP既可利用于顏色反應(yīng)，還可作為氫載體，使水分解產(chǎn)生氧氣；而溶液中的DCIP被還原并發(fā)生顏色變化，這些變化可用儀器進行測定。

(1)制備葉綠體懸液時，先選取10 g新鮮的菠菜葉加入研缽，研磨前加入適量的0.35 mol/L NaCl溶液（維持葉綠體形態(tài)）和pH 7.8的酸堿緩沖液（維持一定的pH）等；研磨成勻漿后，用紗布過濾，取濾液進行離心，分離得到葉綠體；將葉綠體置于0.35 mol/L NaCl（或等滲）溶液中，以保證葉綠體的正常形態(tài)，獲得葉綠體懸液。

(2)①希爾反應(yīng)模擬了光合作用中光反應(yīng)階段的部分變化，該階段在葉綠體的類囊體膜中進行。氧化型DCIP（2，6―二氯酚靛酚）可被還原，因此氧化型DCIP在希爾反應(yīng)中的作用，相當于NADP＋在該光階段中的作用。

②1和2號試管對照的不同是溫度處理后葉綠體的活性，其余均為無關(guān)變量。煮沸處理后，因蒸發(fā)部分水分，因此需向2號試管中補充一定量的蒸餾水，以保證各試管中液體的量相等。

③1和3號試管對照的不同是是否添加DCIP，3號試管沒有添加DCIP，作用是作為對照，測定該濃度葉綠體懸液自身的吸光率。