Question

【題目】黃曲霉毒素B1（AFB1）存在于被黃曲霉菌污染的飼料中，它可以通過(guò)食物鏈進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)并蓄積，引起瘤變。某些微生物能表達(dá)AFB1解毒酶．將該酶添加在飼料中可以降解AFB1，清除其毒性。

回答下列問(wèn)題：

（1）AFB1屬于類(lèi)致癌因子。

（2）AFB1能結(jié)合在DNA 的G 上，使該位點(diǎn)受損傷變?yōu)镚 ' ，在DNA復(fù)制中，G '會(huì)與A配對(duì)。現(xiàn)有受損傷部位的序列為，經(jīng)兩次復(fù)制后，該序列突變?yōu)椤?/span>

（3）下圖為采用基因工程技術(shù)生產(chǎn)AFB1解毒酶的流程圖

據(jù)圖回答問(wèn)題：

① 在甲、乙條件下培養(yǎng)含AFB1解毒酶基因的菌株，經(jīng)測(cè)定，甲菌液細(xì)胞密度小、細(xì)胞含解毒酶：乙菌液細(xì)胞密度大、細(xì)胞不含解毒酶．過(guò)程l 應(yīng)選擇菌液的細(xì)胞提取總RNA ，理由是

② 過(guò)程Ⅱ中，與引物結(jié)合的模版是（）

③ 檢測(cè)酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶，應(yīng)采用方法。

（4）選取不含AFB1的飼料和某種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為材料，探究該AFB1解毒酶在飼料中的解毒效果。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及測(cè)定結(jié)果見(jiàn)下表：

據(jù)表回答問(wèn)題：

①本實(shí)驗(yàn)的兩個(gè)自變量，分別為____________。

② 本實(shí)驗(yàn)中，反映AFB1解毒酶的解毒效果的對(duì)照組是______________ 。

③ 經(jīng)測(cè)定，某污染飼料中AFB1含量為100μg/kg ，則每千克飼料應(yīng)添加 ___克AFB1解毒酶．解毒效果最好。同時(shí)節(jié)約了成本。

（5）采用蛋白質(zhì)工程進(jìn)一步改造該酶的基本途徑是：從提高每的活性出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對(duì)應(yīng)的______序列。

Answer 1

【答案】 化學(xué) 甲 甲菌液細(xì)胞的AFB1解毒酶基因已轉(zhuǎn)錄生成了mRNA，而在乙菌液細(xì)胞中該基因未轉(zhuǎn)錄 AFB1解毒酶基因的 cDNA 抗原-抗體雜交 AFB1的有無(wú)和AFB1解毒酶的含量 B組（或B組+A組） 5 脫氧核苷酸

【解析】試題分析：(1)黃曲霉毒素B1（AFB1）是一種化學(xué)物質(zhì)，屬于化學(xué)致癌因子。

(2)依題意可知：AFB1能使DNA中的G突變?yōu)?/span>G'，G'與A配對(duì)，受損傷部位序列為—AG'T—，該受損傷部位經(jīng)兩次連續(xù)的復(fù)制過(guò)程以及突變后的序列如下：

（3）①分析相應(yīng)的流程圖可知，獲取目的基因（AFB1解毒酶基因）的方法為反轉(zhuǎn)錄法，因此從細(xì)胞中提取的總RNA中，必須含有AFB1解毒酶基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA。已知甲菌液細(xì)胞含解毒酶，說(shuō)明甲菌液細(xì)胞完成了AFB1解毒酶基因的表達(dá)，所以甲菌液含有合成AFB1解毒酶的mRNA模板，因此應(yīng)選擇甲菌液的細(xì)胞提取總RNA；乙菌液細(xì)胞不含解毒酶，說(shuō)明乙菌液細(xì)胞中的AFB1解毒酶基因未完成表達(dá)，所以乙菌液不一定含有合成AFB1解毒酶的mRNA模板，所以不應(yīng)選擇乙菌液的細(xì)胞提取總RNA。

②過(guò)程Ⅱ是以cDNA為模板，采用PCR技術(shù)擴(kuò)增AFB1解毒酶基因的過(guò)程，因此與引物結(jié)合的模版是cDNA。③從分子水平上檢測(cè)酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶，應(yīng)采用抗原—抗體雜交技術(shù)。

(4）①根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)遵循的對(duì)照原則分析：A組與B組的自變量為是否添加AFB1；B組與C、D、E、F組形成對(duì)照，自變量為AFB1解毒酶的含量。

②反映解毒酶效果的對(duì)照組應(yīng)為B組(或A＋B組)。

③表中信息顯示：E組、F組的解毒效果最好，但為了節(jié)約成本，每千克飼料添加5gAFB1解毒酶最適宜。

(5)蛋白質(zhì)工程是從蛋白質(zhì)的功能出發(fā)，推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，然后找到相應(yīng)的脫氧核苷酸序列，最后通過(guò)基因修飾或基因合成達(dá)到目的。