Question

【題目】某同學(xué)對“血紅蛋白的提取和分離“實驗進(jìn)行改進(jìn)和研究，實驗步驟如圖1所示。請回答下列問題：

（1）蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為______________________________等四步。

（2）血紅蛋白由4條肽鏈組成，包括______，血紅蛋白因含有______而呈紅色，這有利于對提取過程的監(jiān)測。

（3）洗滌紅細(xì)胞的目的是______。將樣品稀釋后轉(zhuǎn)移至離心管中，離心后選取______（上層或下層）暗紅色的紅細(xì)胞液體并將其轉(zhuǎn)入燒杯中，加入5倍體積的______進(jìn)行洗滌。

（4）待紅細(xì)胞破裂釋放血紅蛋白后，將得到的混合溶液充分?jǐn)嚢璨㈦x心，結(jié)果如圖2所示。血紅蛋白分布在圖2的______（填序號）層，用濾紙過濾，可得到含血紅蛋白的濾液。

（5）將濾液裝入透析袋中，可除去______的雜質(zhì)。

Answer 1

【答案】樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定 2條α一肽鏈和2條β肽鏈 血紅素 去除雜蛋白，以利于血紅蛋白的分離和純化 下層 生理鹽水 ③ 分子量較小

【解析】

1、血紅蛋白的提取與分離的實驗步驟主要有：

（1）樣品處理：①紅細(xì)胞的洗滌，②血紅蛋白的釋放，③分離血紅蛋白溶液。

（2）粗分離：①分離血紅蛋白溶液，②透析。

（3）純化：調(diào)節(jié)緩沖液面→加入蛋白質(zhì)樣品→調(diào)節(jié)緩沖液面→洗脫→收集分裝蛋白質(zhì)。

（4）純度鑒定--SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。

2、將攪拌好的混合液轉(zhuǎn)移到離心管中，離心后，可以明顯看到試管中的溶液分為4層，從上向下依次是有機(jī)溶劑層、脂類物質(zhì)層、紅細(xì)胞破碎物沉淀層，即第三層為紅色透明的血紅蛋白溶液層。

（1）血紅蛋白提取和分離的程序可分為四大步，包括：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定。

（2）血紅蛋白由4條肽鏈組成，包括2條α肽鏈和2條β肽鏈，血紅蛋白因含有血紅素而呈紅色，這有利于對提取過程的觀察。

（3）洗滌紅細(xì)胞的目的是去除雜蛋白，以利于血紅蛋白的分離和純化。將樣品稀釋后轉(zhuǎn)移至離心管中，離心后選取下層暗紅色的紅細(xì)胞液體并將其轉(zhuǎn)入燒杯中，加入5倍體積的生理鹽水進(jìn)行洗滌。

（4）由分析可知，血紅蛋白分布在圖2的③層。

（5）將濾液裝入透析袋中，可除去分子量較小的雜質(zhì)。