Question

【題目】酒是以水、高粱、小麥為原料，通過固態(tài)發(fā)酵而成。環(huán)境中存在的獨(dú)特微生物是釀制酒獨(dú)特品質(zhì)的關(guān)鍵因素之一。為了提取環(huán)境中的獨(dú)特菌種，某高中學(xué)校生物研究性學(xué)習(xí)小組以優(yōu)質(zhì)的高粱和小麥為原料，制作培養(yǎng)基，搜集、分離空氣中的微生物。請(qǐng)回答下列問題：

（1）該培養(yǎng)基在接種微生物前，必須先進(jìn)行_____滅菌。

（2）將上述培養(yǎng)基暴露在空氣中培養(yǎng)一段時(shí)間后，取10g該培養(yǎng)基用無菌水制成100mL樣品溶液。再將樣品溶液稀釋104倍后，各取樣品溶液0.1mL，在5個(gè)培養(yǎng)基平板上接種。培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長(zhǎng)出的微生物菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。該過程采取的接種方法是_____。每克培養(yǎng)基樣品中的微生物數(shù)量是_____個(gè)。

（3）與用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板記數(shù)相比，該計(jì)數(shù)方法測(cè)得的微生物數(shù)目要低。其原因是_____________ 。

（4）釀酒的主要微生物將葡萄糖分解為酒精的酶存在于_____。其生產(chǎn)酒的總反應(yīng)式可表示為_____。

（5）為了研究發(fā)酵罐中釀酒微生物的生長(zhǎng)情況，常要取樣統(tǒng)計(jì)分析，并測(cè)定pH。若某同學(xué)未將取樣的樣品貼上標(biāo)簽，那么，怎樣確定取樣樣品的先后順序_____。主要依據(jù)是_____。

Answer 1

【答案】高壓蒸汽 稀釋涂布平板法 1.75×108 死亡的微生物不能形成菌落；兩個(gè)或多個(gè)菌體連在一起時(shí)形成一個(gè)菌落 細(xì)胞質(zhì)基質(zhì) 根據(jù)發(fā)酵液的pH大小排序 微生物發(fā)酵過程中發(fā)酵液的pH值逐漸變小

【解析】

微生物常見的接種的方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。每毫升樣品中的細(xì)菌數(shù)=（平板的平均菌落數(shù)÷涂布的體積）×稀釋的倍數(shù)。參與釀酒的微生物是酵母菌，代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型，在有氧條件下，酵母菌大量繁殖，反應(yīng)式為，無氧條件下進(jìn)行酒精發(fā)酵，反應(yīng)式為。

（1）培養(yǎng)基滅菌一般采用高壓蒸汽滅菌法。

（2）根據(jù)題干可知，菌落計(jì)數(shù)采用的方法為稀釋涂布平板法，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)應(yīng)介于30~300之間，故選菌落數(shù)為156、178和191的平板計(jì)數(shù)。每克培養(yǎng)基樣品中的微生物數(shù)量對(duì)應(yīng)的應(yīng)該是每毫升樣品溶液中的微生物數(shù)量，因此每克培養(yǎng)基樣品中的微生物數(shù)量為（156+178+191）÷3÷0.1×105=1.75×108個(gè)。

（3）由于死亡的微生物不能形成菌落，以及兩個(gè)或多個(gè)菌體連在一起時(shí)形成一個(gè)菌落，往往統(tǒng)計(jì)的是一個(gè)菌落，所以用稀釋涂布平板法測(cè)得的微生物數(shù)目要低。

（4）釀酒的主要微生物是酵母菌，酵母菌通過無氧呼吸將葡萄糖分解為酒精，無氧呼吸的場(chǎng)所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，總反應(yīng)式為。

（5）發(fā)酵過程會(huì)產(chǎn)生CO2使培養(yǎng)液pH逐漸降低，因此根據(jù)發(fā)酵液的pH大小確定取樣樣品的先后順序。