Question

【題目】實驗設(shè)計

關(guān)于土壤中某樣品細菌的分離與計數(shù)的實驗操作步驟如下:

土壤取樣:

從肥沃、濕潤的土壤中取樣。先鏟去表層土3左右,再取樣,將樣品裝入事先準備好的________中。

（1）樣品的稀釋

稀釋原因:樣品的________直接影響平板上生長的________

稀釋標(biāo)準:選用一定稀釋范圍的樣品液進行培養(yǎng),保證獲得菌落數(shù)在________之間,便于計數(shù)。

（2）稀釋倍數(shù)

a.測定土壤中細菌的數(shù)量,一般選用________倍的稀釋液進行平板培養(yǎng);

b.測定放線菌的數(shù)量,一般選用________倍的稀釋液進行平板培養(yǎng);

c.測定真菌的數(shù)量,一般選用________倍的稀釋液進行平板培養(yǎng)。

（3）微生物的培養(yǎng)與觀察

培養(yǎng):不同種類的微生物,往往需要不同的培養(yǎng)________和培養(yǎng)________

觀察:每隔________統(tǒng)計一次________數(shù)目,最后選取菌落數(shù)目________時的記錄作為結(jié)果。

（4）細菌的計數(shù)

當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時,取同一________下的3個________進行計數(shù),求出________,并根據(jù)所對應(yīng)的________計算出樣品中細菌的數(shù)目。

Answer 1

【答案】 信封 稀釋程度 菌落數(shù)目 30-300 104、105和106 103、104、105 102、103、104 溫度 時間 24h 菌落 穩(wěn)定 稀釋度 平板 菌落數(shù)的平均值 稀釋度

【解析】試題分析：本題主要考查微生物的分離和計數(shù)等相關(guān)知識點，識記微生物的分離步驟，再結(jié)合題意準確回答本題。

土壤取樣時，由于表層土壤相對干燥，小動物分布較少，所以土壤取樣時，應(yīng)先鏟去表層土3～8cm左右，再取樣，再將樣品裝入事先準備好的信封中。

(1)樣品需要稀釋，因為稀釋程度直接影響平板上生長的菌落數(shù)目，選用一定稀釋范圍的樣品液進行培養(yǎng)，以保證獲得菌落數(shù)在30～300之間，適于計數(shù)的平板。

(2) 在土壤中，細菌的數(shù)量比真菌更多，在測定土壤中不同種類的生物數(shù)量，所用的稀釋倍數(shù)是不同的，為了確保稀釋后能形成菌落數(shù)在30-300之間的培養(yǎng)皿，在進行土壤中微生物的分離與計數(shù)時，就需要按照不同的稀釋度分別進行涂布，測定細菌一般選擇104、105、106倍稀釋，測定放線菌一般選擇103、104、105倍稀釋，測定真菌一般選擇102、103、104倍稀釋。

（3）不同種類的微生物，往往需要不同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間，用稀釋涂布平板法統(tǒng)計活菌數(shù)目時，每隔24h統(tǒng)計一次菌落數(shù)目，最后選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果，這樣可以防止因培養(yǎng)時間不足而遺漏菌落的數(shù)目。

（4）當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時,取同一個稀釋度下3個平板進行計數(shù),求出菌落數(shù)的平均值，并根據(jù)所對應(yīng)的稀釋度計算出樣品中細菌的數(shù)目。