Question

【題目】酵母菌生長的最適宜溫度在20～30℃之間，能在pH為3～7.5的范圍內(nèi)生長，在氧氣充足的環(huán)境中主要以出芽生殖的方式快速增殖。大約每1.5～2小時(shí)增殖一代。某研究性學(xué)習(xí)小組據(jù)此探究酵母菌種群在不同的培養(yǎng)液濃度和溫度條件下種群密度的動(dòng)態(tài)變化，進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)操作步驟如下：

第一步：配制無菌馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)液和活化酵母菌液。

第二步：利用相同多套裝置，在適宜條件下培養(yǎng)。

第三步：用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)裝置中起始酵母菌數(shù)目，做好記錄。

第四步：將各裝置放在其他條件相同且適宜的條件下培養(yǎng)。

第五步：連續(xù)7天，每天隨機(jī)抽時(shí)間取樣計(jì)數(shù)，做好記錄。

回答下列問題：

（1）改正實(shí)驗(yàn)操作步驟中的一處錯(cuò)誤：_____________________________________。

（2）某同學(xué)第5天在使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)時(shí)做法如下：

①搖勻試管，取1mL培養(yǎng)液并稀釋10倍（稀釋樣液的無菌水中加入了幾滴臺(tái)盼藍(lán)染液）。

②先將__________放在計(jì)數(shù)室上，用吸管吸取稀釋后的培養(yǎng)液滴于其邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，多余培養(yǎng)液用濾紙吸去，制作好臨時(shí)裝片。

③顯微鏡下觀察計(jì)數(shù)：在觀察計(jì)數(shù)時(shí)只記______（填“被”或“不被”）染成藍(lán)色的酵母菌。

（3）若在顯微鏡下觀察計(jì)數(shù)某一小方格時(shí)，活菌分布如下圖所示，則記錄的數(shù)目是___________個(gè)。若平均每個(gè)樣方中的酵母菌數(shù)目就是該數(shù)目，所使用的血球計(jì)數(shù)板有16個(gè)中方格，每1中方格中有25個(gè)小方格，每1個(gè)大方格容積為0.1mm3（1mL=1 000mm3）。則酵母菌細(xì)胞個(gè)數(shù)/mL=___________________。

（4）在實(shí)驗(yàn)過程中，培養(yǎng)液的pH值變化為______________。

（5）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，用試管刷蘸洗滌劑擦洗血球計(jì)數(shù)板的做法是錯(cuò)誤的，正確的方法是________________________。

Answer 1

【答案】第五步中應(yīng)每天同一時(shí)間取樣 蓋玻片 不被 8 3.2×108 逐漸變小 浸泡和沖洗

【解析】

1、探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化實(shí)驗(yàn)的原理：

（1）在含糖的液體培養(yǎng)基（培養(yǎng)液）中酵母菌繁殖很快，迅速形成一個(gè)封閉容器內(nèi)的酵母菌種群，通過細(xì)胞計(jì)數(shù)可以測定封閉容器內(nèi)的酵母菌種群隨時(shí)間而發(fā)生的數(shù)量變化。

（2）養(yǎng)分、空間、溫度和有毒排泄物等是影響種群數(shù)量持續(xù)增長的限制因素，細(xì)菌在一定體積培養(yǎng)液中的增長如圖所示：

。

2、通過建立反映種群動(dòng)態(tài)變化的數(shù)學(xué)模型，分別說明種群個(gè)體數(shù)量的增長規(guī)律以及種群外部環(huán)境因素和種群內(nèi)部因素對(duì)種群個(gè)體數(shù)量的制約．
血球計(jì)數(shù)板有16個(gè)中方格，每l中方格中有25個(gè)小方格，即總共有16×25=400個(gè)小方格。計(jì)數(shù)室的容積為0.1mm3（1mL=1000mm3），每個(gè)小方格的體積為mm3，；酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/1mL=平均每個(gè)小方格的酵母菌數(shù)÷每1個(gè)小方格容積×稀釋倍數(shù)=平均每個(gè)小方格的酵母菌數(shù)×400×104×稀釋倍數(shù)。

（1）第五步中“每天隨機(jī)抽時(shí)間取樣計(jì)數(shù)”應(yīng)改為“每天同一時(shí)間（定時(shí)）取樣”，這樣每天取樣時(shí)間間隔相同，是所得的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)更加準(zhǔn)確，畫出的變化曲線更加具有參考價(jià)值。

（2）②在對(duì)酵母菌數(shù)量進(jìn)行抽樣檢測時(shí)，首先振蕩搖勻試管，取1mL培養(yǎng)液并適當(dāng)稀釋，然后將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上，用吸管吸取稀釋后的培養(yǎng)液滴于其邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，多余培養(yǎng)液用濾紙（吸水紙）吸去，制作好臨時(shí)裝片。

③在顯微鏡下觀察計(jì)數(shù)時(shí)，由于死的酵母菌細(xì)胞膜失去選擇透過性，所以被染成藍(lán)色，而活的酵母菌不會(huì)被染色，因此計(jì)數(shù)時(shí)只記不被染成藍(lán)色的酵母菌。

（3）已知所使用的血球計(jì)數(shù)板有16個(gè)中方格，每l中方格中有25個(gè)小方格，每1個(gè)小方格容積為0.1mm3（1mL=1000mm3）。據(jù)圖分析可知每個(gè)小方格平均有8個(gè)酵母菌，則1mL培養(yǎng)液中酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)=平均每個(gè)小方格的酵母菌數(shù)÷每1個(gè)小方格容積×稀釋倍數(shù)=平均每個(gè)小方格的酵母菌數(shù)×400×104×稀釋倍數(shù)=8×400×104×10=3.2×108。

（4）在實(shí)驗(yàn)過程中，由于酵母菌呼吸產(chǎn)生二氧化碳，所以培養(yǎng)液的pH值會(huì)逐漸變小。

（5）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，血球計(jì)數(shù)板應(yīng)該進(jìn)行浸泡和沖洗，而不能用試管刷蘸洗滌劑擦洗。