Question

【題目】戴口罩、勤洗手是預防新型冠狀病毒（COVID--19）的有效措施。某公司在防疫期間推出一款新型免洗洗手凝膠。為衡量該凝膠的清洗效果，研究人員檢測了凝膠洗手前后，手部細菌的含量。凝膠洗手前的檢測流程見下圖。回答下列問題：

（1）在進行實驗前需要配置培養(yǎng)基，培養(yǎng)基指的是________________________。各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源、____________。如果培養(yǎng)乳酸桿菌，還需要在培養(yǎng)基中添加________。

（2）為統(tǒng)計洗手前手部細菌的數(shù)量，應選擇的接種方法是____________（填“稀釋涂布平板法”或“平板劃線法”）。利用該方法統(tǒng)計活菌數(shù)量的原理是________________________。

（3）根據(jù)上圖所示的步驟得出的實驗結(jié)果可信度較低，為了提高實驗結(jié)果的可信度，請給出兩點建議：____________________。

（4）培養(yǎng)一段時間后可根據(jù)__________（至少填兩項）等菌落特征初步判斷培養(yǎng)基上菌種的類型。為了計算洗手前手部單位面積的細菌數(shù)量，除上圖所給的信息外，還需要知道____________________。

Answer 1

【答案】人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需求不同，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì) 無機鹽 維生素 稀釋涂布平板法 當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就可以推測出樣品中大約含有多少活菌 ①同一稀釋度下涂布三個平板，取三個平板上菌落數(shù)的平均值 ②設置一組未接種的空白培養(yǎng)基，排除雜菌污染對實驗結(jié)果造成的干擾 菌落的大小、形狀（隆起程度和顏色） 稀釋倍數(shù)和涂布平板時所取的稀釋液體積

【解析】

1、各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、無機鹽、碳源、氮源；另外，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)、氧氣的要求。

2、微生物常見的接種方法（稀釋涂布平板法可用于微生物的計數(shù)）：
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

（1）培養(yǎng)基指人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需求不同，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。一般培養(yǎng)基中均含有碳源、氮源、水和無機鹽，在培養(yǎng)乳酸桿菌時還需要額外添加維生素。

（2）平板劃線無法得知稀釋倍數(shù)，因此不能用于活菌計數(shù)。稀釋涂布平板法用于活菌計數(shù)的原理是當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就可以推測出樣品中大約含有多少活菌。

（3）實驗設計需要遵循對照原則和平行重復原則，因此需要的改進措施有：①同一種稀釋度下涂布三個平板，取三個平板上菌落數(shù)的平均值；②設置一組未接種的空白培養(yǎng)基，排除雜菌污染對實驗結(jié)果造成的干擾。

（4）菌落的特征包含菌落的大小、性狀、顏色和隆起程度。洗手前手部單位面積的細菌數(shù)量=（平板上的菌落數(shù)÷涂布時取樣的體積×稀釋倍數(shù)×10ml）÷取樣的面積，因此，除圖中所給信息外，還需要知道稀釋倍數(shù)和涂布平板時所取的稀釋液體積。