Question

【題目】應(yīng)用現(xiàn)代生物技術(shù)可以大量獲得針對(duì)甲型H1N5病毒的抗體，并可用于臨床治療，如圖表示制備該抗體的設(shè)想，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題

（1）在培育轉(zhuǎn)入甲型H1N5病毒抗體基因的牛的過程中，①過程需要的工具酶是_________。②過程常用的方法是___________。

（2）轉(zhuǎn)入甲型H1N5病毒抗體基因的牛可通過分泌乳汁來(lái)生產(chǎn)甲型H1N5病毒抗體，在基因表達(dá)中，甲型H1N5病毒抗體基因的首端必須含有_______，它是__________識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)。③過程培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚階段，可以采用______技術(shù)，培養(yǎng)出多頭相同的轉(zhuǎn)基因牛。

（3）prG能激發(fā)細(xì)胞不斷分裂，通過基因工程導(dǎo)入該調(diào)控基因可制備單克隆抗體，Ⅰ最可能是_______細(xì)胞，Ⅱ代表的細(xì)胞具有_______的特點(diǎn)。

（4）制備單克隆抗體也可以用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)，與動(dòng)物細(xì)胞融合過程不同，植物體細(xì)胞雜交在細(xì)胞融合之前要用_________________對(duì)細(xì)胞進(jìn)行處理。

Answer 1

【答案】限制酶、DNA 連接酶 顯微注射法 啟動(dòng)子 RNA 聚合酶 胚胎分割 漿 既能在體外大量增殖，又能產(chǎn)生專一抗體 纖維素酶、果膠酶

【解析】

分析題圖：甲型H1N5病毒抗體基因是目的基因，圖中①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；②是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞；③胚胎移植等過程。prG是一種調(diào)控因子，也可以作為基因工程的目的基因，因?yàn)橹挥袧{細(xì)胞能產(chǎn)生抗體，所以圖中|是漿細(xì)胞，Ⅱ是導(dǎo)入prG能無(wú)限增殖的細(xì)胞。

（1）由以上分析可知：①是基因工程中基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，需要先用限制酶切割目的基因和運(yùn)載體，后用DNA連接酶連接成重組DNA。將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法。

（2）基因表達(dá)載體包括啟動(dòng)子、目的基因、標(biāo)記基因和終止子等，所以在甲型H1N5病毒抗體基因的首端必須含有啟動(dòng)子。它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)，③是胚胎移植過程，移植前需將受精卵培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚時(shí)期再植入母體。因?yàn)閬?lái)自同一胚胎的后代具有相同的基因型，所以要培養(yǎng)出多頭相同的轉(zhuǎn)基因奶牛，可以采用胚胎分割技術(shù)。

（3）只有漿細(xì)胞能分泌抗體，因此I最可能是漿細(xì)胞（效應(yīng)B細(xì)胞）細(xì)胞。導(dǎo)入prG后漿細(xì)胞才具備無(wú)限增殖的能力，因此篩選出的Ⅱ細(xì)胞既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生特定抗體。

（4）植物體細(xì)胞雜交在細(xì)胞融合之前要用酶解法去細(xì)胞壁，即用纖維素酶和果膠酶對(duì)細(xì)胞進(jìn)行處理，以除去細(xì)胞壁。