Question

【題目】（四）回答下列有關(guān)生物工程的問(wèn)題

從人的胰島細(xì)胞中制備胰島素編碼基因，將其與合適的質(zhì)粒用產(chǎn)自大腸桿菌的DNA連接酶拼接成重組分子，后者導(dǎo)入酵母中便可實(shí)現(xiàn)重組人胰島素的工業(yè)化生產(chǎn)，用于糖尿病的治療。

【1】下列與質(zhì)粒的基本單位相同的有_____________ （填編號(hào)）

① 胰島素基因 ② mRNA ③ 擬核DNA ④ 人胰島素

【2】若人胰島素編碼基因兩端是用限制酶PstI（識(shí)別序列和切割位點(diǎn)如圖2所示）切開(kāi)的，那么如圖1所示的質(zhì)粒應(yīng)使用限制酶________切開(kāi)，才能保證人胰島素編碼基因與質(zhì)粒直接粘連拼接。

【3】已轉(zhuǎn)到重組質(zhì)粒上的單個(gè)人胰島素編碼基因能否再用2題中的限制酶切開(kāi)？__________，理由是_________________。

【4】將重組質(zhì)粒導(dǎo)入酵母細(xì)胞，并進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)便可獲得人胰島素產(chǎn)品。上述人胰島素產(chǎn)品生產(chǎn)過(guò)程中利用到的生物工程領(lǐng)域有___________。（填編號(hào)）

①發(fā)酵工程 ②基因工程 ③細(xì)胞工程 ④酶工程

【5】醫(yī)學(xué)上還利用生物工程技術(shù)將小鼠骨髓瘤細(xì)胞與一種B淋巴細(xì)胞融合，融合后細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生單克隆抗體，其理論依據(jù)有___________ 。（填編號(hào)）

①骨髓瘤細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無(wú)限增殖

②骨髓瘤細(xì)胞可以無(wú)限增殖，但不能產(chǎn)生抗體

③B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無(wú)限增殖

④B淋巴細(xì)胞只有與骨髓瘤細(xì)胞融合才能產(chǎn)生抗體

Answer 1

【答案】

【1】① ③

【2】NsiⅠ

【3】不能沒(méi)有相應(yīng)的識(shí)別序列

【4】① ②

【5】② ③

【解析】本題考查 了基因工程、動(dòng)物細(xì)胞融合的相關(guān)知識(shí)。需要考生正確識(shí)圖，并且理解基因工程的操作工具的相關(guān)知識(shí)、掌握制備單克隆抗體的理論依據(jù)，在此基礎(chǔ)上，再結(jié)合題目要求進(jìn)行綜合分析、答題。

【1】質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA之外，并具有自我復(fù)制能力的很小的雙鏈環(huán)狀DNA分子，其基本組成單位是脫氧核苷酸。① 胰島素基因是DNA上有遺傳效應(yīng)的片段，其基本組成單位是脫氧核苷酸；② mRNA的基本組成單位是核糖核苷酸；③ 擬核DNA的基本組成單位是脫氧核苷酸； ④ 人胰島素的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，其基本組成單位是氨基酸。因此，與質(zhì)粒的基本單位相同的有①、③。

【2】據(jù)圖可知，限制酶PstI和限制酶NsiⅠ的識(shí)別序列雖然不同，但是切割后產(chǎn)生的末端均為相同，因此這兩種酶切割出來(lái)的DNA片段可以互補(bǔ)配對(duì)。若人胰島素編碼基因兩端是用限制酶PstI，那么如圖1所示的質(zhì)粒應(yīng)使用限制酶NsiⅠ切開(kāi)，才能保證人胰島素編碼基因與質(zhì)粒直接粘連拼接。

【3】限制酶PstI和限制酶NsiⅠ切割能得到相同的黏性末端，可以用DNA連接酶催化連接。當(dāng)連接后，沒(méi)有了兩種酶的識(shí)別序列，因此兩種酶不能再切割了。

【4】將含有人胰島素基因的重組質(zhì)粒導(dǎo)入酵母細(xì)胞，利用了基因工程；對(duì)轉(zhuǎn)基因酵母進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)以獲得人胰島素產(chǎn)品，利用了發(fā)酵工程；上述人胰島素產(chǎn)品生產(chǎn)過(guò)程中沒(méi)有用到細(xì)胞工程和酶工程。

【5】骨髓瘤細(xì)胞可以無(wú)限增殖，但不能產(chǎn)生抗體，故①錯(cuò)誤、②正確；B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無(wú)限增殖，③正確；B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成的雜交瘤細(xì)胞既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體，④錯(cuò)誤。