Question

43.（10分）已知細胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能破氨基嘌呤阻斷。人淋巴細胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖，將這兩種細胞在試管中混合，促融獲得雜種細胞。請回答：

（1）試管中加入這兩種細胞后，還要加入誘導劑，除融合的雜種細胞外，還有__________種融合細胞，細胞融合所依據(jù)的原理是__________。

（2）設(shè)計一方法（不考慮機械方法），從培養(yǎng)液中分離出雜種細胞，并說明原理：

方法：在培養(yǎng)液中加入__________，培養(yǎng)后收集增殖細胞。

原理：培養(yǎng)液中加入該物質(zhì)后，下列細胞中，不能生長的細胞有__________（寫序號），不能生長的原因是__________，有的細胞能生長，原因是__________。

①骨髓瘤細胞  ②融合的淋巴細胞  ③雜種細胞  ④融合的骨髓瘤細胞  ⑤淋巴細胞

（3）培養(yǎng)分離出的雜種細胞，培養(yǎng)液中除了有糖、氨基酸、水、無機鹽、微量元素、促生長因子外，還必須添加__________，同時還應控制好培養(yǎng)液的溫度、__________（至少寫兩點）等外界環(huán)境條件。若出現(xiàn)細胞的接觸抑制時，應用__________處理后分瓶培養(yǎng)。

（4）將分離出的雜種細胞在不同條件下繼續(xù)培養(yǎng)，獲得A、B、C三細胞株。各細胞株內(nèi)含有的人染色體如表（“+”有，“-”無），測定各細胞株中人體所具有的五種酶的活性。結(jié)果是：①B株有a酶活性：②A、B、C株均有b酶活性；③A、B株有c酶活性；④C株有d酶活性；⑤A、B、C株均無e酶活性。若人基因的作用不受鼠基因的影響，則支配a、b、c、d和e酶合成的基因依次位于人的第__________號染色體上。

細胞株	人染色體編號
	1	2	3	4	5	6	7	8
A株	+	+	+	+	-	-	-	-
B株	+	+	-	-	+	+	-	-
C株	+	-	+	-	+	-	+	-

Answer 1

43. （1）2  細胞膜的流動性

    （2）氨基嘌呤   ①②④⑤    加入氨基嘌呤后，使D合成途徑阻斷，僅有D全合成途徑的骨髓細胞及其彼此融合的細胞就不能增殖，淋巴細胞一般不分裂增殖

    人淋巴細胞和骨髓癌細胞融合后的雜種細胞中可以利用淋巴細胞中的S途徑合成DNA而增殖。

    （3）動物血清    PH、滲透壓、溶解氧    胰蛋白酶

    （4）6、1、2、7、8