Question

【題目】體細(xì)胞核移植已經(jīng)成功克隆了多種哺乳動(dòng)物，但成功率很低。研究表明一定濃度的TSA（曲古抑菌素A）能提高克隆胚胎的囊胚發(fā)育率及克隆后代的存活率，為了優(yōu)化TSA的處理方案，科研人員研究了TSA濃度及處理時(shí)間對(duì)豬核移植胚胎體外發(fā)育的影響，其基本操作過程如下，過程①中添加TSA。請(qǐng)據(jù)圖回答問題：

（1）收集的卵母細(xì)胞應(yīng)培養(yǎng)到______期進(jìn)行去核，去核的同時(shí)一并將______ 去掉。

（2）過程①除加入激素、氨基酸、維生素等營養(yǎng)物質(zhì)外，還需加入__等天然成分，培養(yǎng)的氣體中應(yīng)控制5%左右的CO2,其目的是______。

（3）在進(jìn)行過程②操作前應(yīng)對(duì)代孕母豬進(jìn)行______ 處理，使生殖器官處于相同的生理狀態(tài)；通過手術(shù)進(jìn)行過程②操作，應(yīng)從______（部位）將早期胚胎注入子宮，可提高胚胎的著床率。

（4）下表1表示實(shí)驗(yàn)一（不同濃度TSA處理重組細(xì)胞12h）的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，下表2表示在實(shí)驗(yàn)一基礎(chǔ)之上做的實(shí)驗(yàn)二（某濃度TSA處理重組細(xì)胞12h和24h）的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。實(shí)驗(yàn)二所用TSA的濃度是___，表2數(shù)據(jù)表明______ 有助于提高豬核移植胚胎的發(fā)育潛能。

Answer 1

【答案】減數(shù)第二次分裂中 第一極體 動(dòng)物血清 維持培養(yǎng)液的pH 同期發(fā)情處理 子宮角 40nmol·L-1 控制好TSA處理的時(shí)間（或?qū)�TSA處理時(shí)間控制12小時(shí)左右）

【解析】

上圖為細(xì)胞核移植過程，將去核的卵母細(xì)胞與成纖維細(xì)胞融合形成重組細(xì)胞，經(jīng)過①動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)形成早期胚胎A，將早期胚胎經(jīng)過胚胎移植到代孕母豬體內(nèi)，經(jīng)過代孕母豬孕育后并分娩。

（1）卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期時(shí)進(jìn)行去核，去核的同時(shí)一并將第一極體去掉。

（2）過程①為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程，培養(yǎng)基中除加入激素、氨基酸、維生素等營養(yǎng)物質(zhì)外，還需加入動(dòng)物血清等天然成分，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程提供二氧化碳的作用是維持培養(yǎng)液的pH。

（3）將早期胚胎移入代孕母豬的子宮的過程為胚胎移植，為使代孕母豬與供體豬的生殖器官的生理變化相同，移植前需要對(duì)代孕母豬做同期發(fā)情處理。通過手術(shù)進(jìn)行胚胎移植時(shí)，應(yīng)從子宮角將早期胚胎注入子宮，可提高胚胎的著床率。

（4）本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表觀，40μmol·L－1的TSA對(duì)豬囊胚的形成較為有利，其判斷依據(jù)是囊胚數(shù)占重組細(xì)胞數(shù)的比例較高。實(shí)驗(yàn)二的自變量是TSA處理時(shí)間，故實(shí)驗(yàn)所用TSA的濃度應(yīng)最適，所以實(shí)驗(yàn)二所用TSA的濃度是40μmol·L－1，表2數(shù)據(jù)表明TSA處理時(shí)間為12小時(shí)比處理24小時(shí)有利于囊胚數(shù)形成，所以表2數(shù)據(jù)表明控制好TSA處理的時(shí)間（或?qū)�TSA處理時(shí)間控制12小時(shí)左右）有助于提高豬核移植胚胎的發(fā)育潛能。