Question

【題目】GOLS2基因表達(dá)可提高植物細(xì)胞內(nèi)糖類含量，降低植物葉片氣孔開度�？蒲腥藛T將擬南芥GOLS2基因?qū)�人并整合到水稻染色體上。請回答下列問題：

（1）從cDNA文庫中獲得的目的基因___________ （填“含有”或“不含有”）啟動子和終止子。通過PCR技術(shù)獲取GOLS2基因的原理是_________________________，需設(shè)計_____種引物。

（2）GOLS2基因可以整合到水稻染色體上的遺傳學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)是____________。需將GOLS2基因拼接在運(yùn)載體上才能成功轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)化指的是___________________。

（3）基因表達(dá)載體的組成除了GOLS2基因外，還必須有___________等；在構(gòu)建基因表達(dá)載體過程中，常把兩個啟動子串聯(lián)在一起形成雙啟動子，加在GOLS2基因上游，雙啟動子的作用可能是________________，進(jìn)一步提高細(xì)胞內(nèi)糖類含量。

Answer 1

【答案】不含有 DNA雙鏈復(fù)制 2 不同生物DNA分子的基本結(jié)構(gòu)相同 目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程 標(biāo)記基因、啟動子、終止子 保證目的基因的高效轉(zhuǎn)錄（表達(dá)）

【解析】

cDNA文庫只包含該物種部分基因，同一物種的cDNA文庫不只1種，真核生物的基因組文庫中的基因含有內(nèi)含子、啟動子、終止子等，而從某生物cDNA文庫中獲取的目的基因不含有啟動子、終止子、內(nèi)含子和非編碼區(qū)等。一個基因表達(dá)載體的組成主要有目的基因、標(biāo)記基因、啟動子和終止子，其中啟動子位于基因首端，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點，標(biāo)記基因的作用是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。

（1）cDNA基因文庫中的DNA是通過逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的，所以從cDNA文庫中獲得的目的基因不含有啟動子和終止子。通過PCR技術(shù)獲取GOLS2基因的原理是DNA雙鏈復(fù)制，需設(shè)計2種引物。

（2）由于不同生物DNA分子的基本結(jié)構(gòu)相同，所以GOLS2基因可以整合到水稻染色體上。基因工程中的轉(zhuǎn)化指的是目的基因進(jìn)人受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程。

（3）基因表達(dá)載體的組成除了GOLS2基因外，還必須有標(biāo)記基因、啟動子、終止子等；在構(gòu)建基因表達(dá)載體過程中，常把兩個啟動子串聯(lián)在一起形成雙啟動子，加在GOLS2基因上游，雙啟動子的作用可能是保證目的基因的高效轉(zhuǎn)錄（表達(dá)），進(jìn)一步提高細(xì)胞內(nèi)糖類含量。