Question

【題目】下圖中的供體DNA中含有無(wú)限增殖調(diào)控基因，該基因能激發(fā)動(dòng)物細(xì)胞的分裂，圖示是利用該基因和小鼠制備新型單克隆抗體的過(guò)程。

（1）該過(guò)程的目的基因是_________，質(zhì)粒被酶A切割后形成_________個(gè)游離的磷酸。經(jīng)酶A處理后的Ⅰ與質(zhì)粒可產(chǎn)生相同的_________，所以能夠?qū)崿F(xiàn)重組。

（2）圖中將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的適宜方法是_________，Ⅱ細(xì)胞是已免疫_________。

（3）通常用_________培養(yǎng)基進(jìn)行篩選獲得Ⅲ細(xì)胞，Ⅲ細(xì)胞的特點(diǎn)是既能無(wú)限增殖，又能_________。

（4）該過(guò)程涉及到的生物技術(shù)有_________（答出兩點(diǎn)）。

Answer 1

【答案】無(wú)限增殖調(diào)控基因2黏性末端顯微注射法B淋巴細(xì)胞選擇性產(chǎn)生專一性抗體轉(zhuǎn)基因技術(shù)（DNA重組技術(shù)）、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)

【解析】

分析題圖：酶A是限制性核酸內(nèi)切酶；酶B是DNA連接酶。II細(xì)胞具有分泌抗體的能力；重組細(xì)胞Ⅲ既有無(wú)限增殖的能力，又能分泌特異性抗體。圖中涉及的技術(shù)主要有轉(zhuǎn)基因技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。

（1）據(jù)圖可知，圖示是利用該基因和小鼠制備新型單克隆抗體的過(guò)程，因此需要細(xì)胞III既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生抗體，細(xì)胞III內(nèi)應(yīng)含有無(wú)限增殖調(diào)控基因，即無(wú)限增殖調(diào)控基因是該過(guò)程的目的基因，質(zhì)粒被酶A切割后，質(zhì)粒變?yōu)榫�性雙鏈DNA分子，因每條鏈上含有一個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，因此切割后含有兩個(gè)游離的磷酸基團(tuán)。經(jīng)酶A處理后的Ⅰ與質(zhì)�？僧a(chǎn)生相同的黏性末端，所以能夠?qū)崿F(xiàn)重組。

（2）將目的基因?qū)�入不同�?xì)胞用不同的方法。導(dǎo)入植物細(xì)胞：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法（轉(zhuǎn)基因抗蟲棉用的是花粉管通道法）；導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞：顯微注射技術(shù)（注射入受精卵中）；導(dǎo)入原核生物：一般是將細(xì)菌用氯化鈣處理，以增大細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性，使含有目的基因的重組質(zhì)粒進(jìn)入受體細(xì)胞。圖中的受體細(xì)胞為動(dòng)物細(xì)胞，因此采用的適宜方法為顯微注射法，圖中是生產(chǎn)單克隆抗體的過(guò)程，因此Ⅱ細(xì)胞是已免疫B淋巴細(xì)胞。

（3）單克隆抗體制備過(guò)程中，總共有兩次篩選，第一次篩選出雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，兩次篩選均需要用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選獲得Ⅲ細(xì)胞，Ⅲ細(xì)胞的特點(diǎn)是既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生專一性抗體。

（4）據(jù)圖可知該過(guò)程涉及到的生物技術(shù)有轉(zhuǎn)基因技術(shù)（DNA重組技術(shù)）、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。