Question

【題目】高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如下圖所示，請據(jù)圖回答有關(guān)問題：

（1） 過程①②合稱為_________。從功能上看，Ⅰ號培養(yǎng)基屬于________；該培養(yǎng)基中必須以________作為唯一碳源。 Ⅱ號培養(yǎng)基的接種方法為_________。

（2）對配制的培養(yǎng)基采用的滅菌方法是__________。

（3）在Ⅰ號培養(yǎng)基上挑出能產(chǎn)生淀粉酶的嗜熱菌菌落的鑒別方法是培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的______________；也可將得到的菌懸液轉(zhuǎn)接于同時含有葡萄糖和淀粉作碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到若干菌落后用碘液作顯色處理，看到如下圖所示情況，可判斷圖中周圍_____________的菌落含有所需菌種。

（4）如果高溫淀粉酶的產(chǎn)業(yè)化需要其活性在固定化處理時不受損失，且在多次重復使用后仍能維持穩(wěn)定的酶活性，則應選擇下圖中的______________（填寫字母）固定化工藝。

Answer 1

【答案】稀釋涂布平板法選擇培養(yǎng)基淀粉平板劃線法高壓蒸汽滅菌法透明圈不顯藍色C

【解析】

本實驗目的是從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，因此需要配制以淀粉為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基；圖示可見，①過程是梯度稀釋；②過程是用涂布平板法進行接種的過程。培養(yǎng)基配制和滅菌過程中，應注意先調(diào)節(jié)PH，后滅菌，一般培養(yǎng)基滅菌常用高壓蒸汽滅菌法，高壓蒸汽滅菌法是可以殺滅芽孢在內(nèi)的所有微生物的一種滅菌方法。部分嗜熱菌在Ⅰ號培養(yǎng)基上生長時可產(chǎn)生淀粉酶，分解培養(yǎng)基中的淀粉后會在菌落周圍形成透明圈，透明圈越大，說明產(chǎn)生淀粉越多，因此應挑選透明圈大的菌落接種在Ⅱ號培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。

(1)據(jù)圖分析，從液體菌種到固體平板的過程及結(jié)論生長均勻分析，過程①②合稱為稀釋涂布平板法。按功能分，Ⅰ號培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，需要使用以淀粉為唯一的碳源；Ⅱ號培養(yǎng)基的接種方法是平板劃線法。

(2)對培養(yǎng)基滅菌常用高壓蒸汽滅菌法。

(3)根據(jù)題意可知，Ⅰ號培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的透明圈可以鑒別嗜熱菌菌落。淀粉與碘液反應呈藍色，但如果淀粉分解菌中的淀粉酶將淀粉水解后就不能呈藍色，則會出現(xiàn)無色的透明圈，故圖乙所示情況中無藍色透明圈的菌落含有所需菌種。

(4)據(jù)圖分析，A是物理吸附法，B是化學結(jié)合法，C是包埋法。因為酶容易從包埋材料中漏出，所以一般不使用包埋法；化學結(jié)合法可能會對酶活性產(chǎn)生影響，想要酶活性在固定化處理時不受損失，且在多次重復使用后仍能維持穩(wěn)定的酶活性，則應選擇圖中C。