Question

【題目】圖甲是從土壤中篩選產(chǎn)纖維素酶細菌的過程，圖乙是纖維素酶基因轉(zhuǎn)錄的mRNA部分序列，已知終止密碼子為UAA、UAG、UGA。請回答下列問題：

（1）圖甲中細菌培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基成分上的主要區(qū)別是后者___________。

（2）土壤樣品需稀釋后震蕩搖勻，用___________準確吸取0.1mL土壤懸液，滴加在培養(yǎng)基中，均勻涂布，將培養(yǎng)皿倒置后放在___________中培養(yǎng)一段時間，獲得細菌菌落。

（3）在5個細菌培養(yǎng)基平板上，共接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品液0.5mL，培養(yǎng)一段時間后，平板上長出的細菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191，則每毫升土壤樣品中的細菌數(shù)量為___________個。

（4）研究人員用鑒別培養(yǎng)基來鑒定細菌，已知剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上得到部分有透明圈降解圈的菌落（見下圖），圖中菌落___________的細菌最適合作為目的菌保存。不考慮基因突變，上圖甲中鑒別培養(yǎng)基中的菌落周圍是否都有透明圈？___________。

（5）圖中菌種若要長期保存，應(yīng)該將其放在___________條件下。

Answer 1

【答案】 纖維素為唯一碳源 胰液管或胰液槍 恒溫箱 1.75×108 ① 是 低溫管藏

【解析】試題分析：土壤中存在著大量纖維素分解酶，包括真菌、細菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復(fù)合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長，其他微生物則不能生長。在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。mRNA是以DNA的一條鏈為模板轉(zhuǎn)錄形成的，翻譯過程中，mRNA中每3個堿基決定一個氨基酸，所以經(jīng)翻譯合成的蛋白質(zhì)分子中氨基酸的數(shù)目是mRNA堿基數(shù)目的1/3，是DNA（基因）中堿基數(shù)目的1/6，即DNA（或基因）中堿基數(shù)：mRNA上堿基數(shù)：氨基酸個數(shù)=6：3：1。

（1）纖維素分解菌能夠利用纖維素，而其他微生物不能，因此圖甲中的選擇培養(yǎng)基應(yīng)該以纖維素為唯一碳源。

（2）土壤樣品需稀釋后震蕩搖勻，然后用胰液管或胰液槍準確吸取0.1mL土壤懸液；接種后培養(yǎng)皿應(yīng)該倒置并放入恒溫箱培養(yǎng)。

（3）為了計數(shù)結(jié)果準確，統(tǒng)計的菌落數(shù)應(yīng)介于30～300之間，故選擇細菌菌落數(shù)為156、178和191的平板計數(shù)，因此每克該土壤樣品中的菌落數(shù)對應(yīng)的應(yīng)該是每毫升菌液中的細菌數(shù)目，即每克該土壤樣品中的菌落數(shù)為（156+178+191）÷3÷（10÷100）×105=1.75×108個。

（4）