Question

【題目】草甘膦是一種廣譜除草劑，其除草機(jī)制是抑制植物體內(nèi)EPSPS酶的合成，影響植物正常生長(zhǎng)，最終導(dǎo)致植物死亡。目前，發(fā)現(xiàn)可以從一種抗草甘膦的大腸桿菌突變株中分離出EPSPS基因，若將該基因轉(zhuǎn)入植物細(xì)胞內(nèi)，獲得的轉(zhuǎn)基因植物能耐受高濃度的草甘膦。取6株植物，其中，植物A和D對(duì)草甘膦敏感，B和E對(duì)草甘膦天然具有抗性，C和F則經(jīng)過轉(zhuǎn)基因處理，但是否成功未知（轉(zhuǎn)基因處理過程不影響植物正常生長(zhǎng)）。圖1為4種限制酶的識(shí)別序列和酶切位點(diǎn)，圖2為含有目的基因的DNA片段及其具有限制酶切點(diǎn)。據(jù)圖回答：

（1）若A、B、C澆清水，D、E、F澆含有草甘膦的水，則A～F植物中，一定能正常生長(zhǎng)的是_________________。

（2）一個(gè)完整的基因表達(dá)載體除復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子和終止子外，還應(yīng)包括_________________。若利用酶切法獲得目的基因，最應(yīng)選擇的限制酶是_________________和_________________。

（3）假設(shè)EPSPS基因已被成功轉(zhuǎn)移到植物F中，但植物F沒有表現(xiàn)出抗性，分析可能的原因_________________。

Answer 1

【答案】A、B、C、E 目的基因、標(biāo)記基因 MspⅠ SmaⅠ 目的基因沒有成功表達(dá)

【解析】

根據(jù)題意分析可知：植物A和D對(duì)草甘膦敏感，B和E對(duì)草甘膦天然具有抗性，C和F則經(jīng)過了轉(zhuǎn)基因處理，所以A-C澆清水，都能健康成長(zhǎng)。F雖經(jīng)過了轉(zhuǎn)基因處理，但是否成功還未知，所以D-F澆的水中含有草甘膦，D肯定不能健康成長(zhǎng)，E肯定能健康成長(zhǎng)，F未知。一種限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。

（1）根據(jù)題意分析可知：植物A和D對(duì)草甘膦敏感，B和E對(duì)草甘膦天然具有抗性，C和F則經(jīng)過了轉(zhuǎn)基因處理，所以A、B、C澆清水，都能健康成長(zhǎng)。F雖經(jīng)過了轉(zhuǎn)基因處理，但是否成功還未知，所以D、E、F澆的水中含有草甘膦，D肯定不能健康成長(zhǎng)，E肯定能健康成長(zhǎng)，F未知。因此肯定能健康成長(zhǎng)的是ABCE。

（2）一個(gè)完整的基因表達(dá)載體包括目的基因、復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因；根據(jù)圖1可知，如果用MboⅠ酶進(jìn)行切割，還會(huì)將BamHⅠ酶識(shí)別處的片段進(jìn)行切割，因此只能選擇限制酶MspⅠ和SmaⅠ切割目的基因。

（3）假設(shè)EPSPS基因已被成功轉(zhuǎn)移到植物F中，說明F中已含有EPSPS基因，如果仍沒有表現(xiàn)出抗性，則說明EPSPS基因在受體細(xì)胞中沒有表達(dá)或表達(dá)的酶沒有活性。