Question

I 已知SARS是由一種RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康復(fù)后的血清中有抗S蛋白的特異性抗體。某研究小組為了研制預(yù)防SARS病毒的疫苗，開(kāi)展了前期研究工作。其簡(jiǎn)要的操作流程如下：

 

 

 

 

 

 

（1）實(shí)驗(yàn)步驟①所代表的反應(yīng)過(guò)程是             。

（2）步驟②構(gòu)建重組表達(dá)運(yùn)載體A和重組表達(dá)運(yùn)載體B必須使用限制性?xún)?nèi)切酶和

          酶，后者的作用是將用限制性?xún)?nèi)切酶切割的            和          連接起來(lái)。

（3）如果省略步驟②而將大量擴(kuò)增的S基因直接導(dǎo)入大腸桿菌，一般情況下，不能得到表達(dá)的S蛋白，其原因是S基因在大腸桿菌中不能              ，也不能            。

（4）為了檢驗(yàn)步驟④所表達(dá)的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性，可用

                與                  進(jìn)行抗原―抗體特異性反應(yīng)實(shí)驗(yàn)，從而得出結(jié)論。

II． 1958年，Meselson和Stahl通過(guò)一系列實(shí)驗(yàn)首次證明了DNA的半保留復(fù)制，此后科學(xué)家便開(kāi)始了有關(guān)DNA復(fù)制起點(diǎn)數(shù)目、方向等方面的研究。試回答下列問(wèn)題：

（1）由于DNA分子呈___________結(jié)構(gòu)，DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)首先必需解旋從而在復(fù)制起點(diǎn)位置形成復(fù)制叉（如圖1）。因此，研究中可以根據(jù)復(fù)制叉的數(shù)量推測(cè)___________________。

（2）1963年Cairns將不含放射性的大腸桿菌（擬核DNA呈環(huán)狀）放在含有³H-胸腺嘧啶的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，進(jìn)一步證明了DNA的半保留復(fù)制。根據(jù)右邊的大腸桿菌親代環(huán)狀DNA示意圖，在答題紙的相應(yīng)方框內(nèi)用簡(jiǎn)圖表示復(fù)制一次和復(fù)制兩次后形成的DNA分子。（注：以“……”表示含放射性的脫氧核苷酸鏈）。

（3）DNA的復(fù)制從一點(diǎn)開(kāi)始以后是單向還是雙向進(jìn)行的，用不含放射性的大腸桿菌DNA放在含有³H-胸腺嘧啶的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，給以適當(dāng)?shù)臈l件，讓其進(jìn)行復(fù)制，得到圖3所示結(jié)果，這一結(jié)果說(shuō)明________________。

（4）為了研究大腸桿菌DNA復(fù)制是單起點(diǎn)復(fù)制還是多起點(diǎn)復(fù)制，用第（2）題的方法，觀察到的大腸桿菌DNA復(fù)制過(guò)程如圖4所示，這一結(jié)果說(shuō)明大腸桿菌細(xì)胞中DNA復(fù)制是            起點(diǎn)復(fù)制的。

Answer 1

 I  （1）逆轉(zhuǎn)錄   

（2）DNA連接     運(yùn)載體     S基因

（3）復(fù)制    合成S基因的mRNA  

（4）大腸桿菌中表達(dá)的S蛋白   SARS康復(fù)病人血清（或抗S蛋白的特異性抗體）

II．

（1）（立體的規(guī)則）雙螺旋      復(fù)制起點(diǎn)數(shù)量 

（2）下圖（4分，每個(gè)正確答案得2分）

（3）DNA復(fù)制是雙向的 

（4）單