Question

【題目】隨著全球環(huán)境的惡化和吸煙的影響，人類肺癌的發(fā)病率有上升趨勢(shì)。取人的肺癌細(xì)胞免疫過(guò)的小鼠以制備能和人的肺癌細(xì)胞特異性結(jié)合的單克隆抗體，可用于人類肺癌的免疫檢測(cè)，其制備流程如圖所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題

（1）為獲得人的肺癌細(xì)胞免疫過(guò)的小鼠，需要將______________注射到小鼠體內(nèi)。B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合的原理是_____________，該過(guò)程中可加入化學(xué)物質(zhì)_____________促進(jìn)細(xì)胞的融合。

（2）①過(guò)程使用的培養(yǎng)基為牛血清-HAT選擇培養(yǎng)基，與人工配制的培養(yǎng)基相比，利用血清培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)是_________________________；HAT選擇培養(yǎng)基上的各種細(xì)胞中，_____________________________細(xì)胞都會(huì)死亡，從而篩選出所需的細(xì)胞。②過(guò)程要經(jīng)過(guò)_______________________兩個(gè)階段，并進(jìn)行多次篩選，最終才能獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。

（3）選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞后，還要將該雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的特異性抗體與人的正常肺部細(xì)胞混合培養(yǎng)，其目的是篩選出___________________________；應(yīng)用單克隆抗體檢測(cè)肺癌的優(yōu)點(diǎn)在于__________________________________。

Answer 1

【答案】人的肺癌細(xì)胞 細(xì)胞膜的流動(dòng)性 聚乙二醇（或PEG） 血清中含有細(xì)胞所需的一些人類未知的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的（或未融合的B淋巴細(xì)胞、未融合的骨髓瘤細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞） 克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測(cè) 能結(jié)合肺癌細(xì)胞，而不與正常肺部細(xì)胞結(jié)合的單克隆抗體 特異性強(qiáng)，靈敏度高

【解析】

單克隆抗體的制備過(guò)程是：對(duì)小動(dòng)物注射抗原，從該動(dòng)物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體。誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有：物理法（離心、振動(dòng)）、化學(xué)法（聚乙二醇）、生物法（滅活的病毒）。

（1）為獲得人的肺癌細(xì)胞免疫過(guò)的小鼠，需要將人的肺癌細(xì)胞當(dāng)作抗原注射到小鼠體內(nèi)。動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性，誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合常用的化學(xué)方法是加入化學(xué)物質(zhì)聚乙二醇（或PEG）。

（2）①與人工配制的培養(yǎng)基相比，血清中含有細(xì)胞所需的一些人類未知的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；HAT選擇培養(yǎng)基中未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的（或未融合的B淋巴細(xì)胞、未融合的骨髓瘤細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞）細(xì)胞都會(huì)死亡，從而篩選出所需的細(xì)胞。

②過(guò)程要經(jīng)過(guò)克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測(cè)兩個(gè)階段，并進(jìn)行多次篩選，最終才能獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。

（3）為篩選出能結(jié)合肺癌細(xì)胞，而不與正常肺部細(xì)胞結(jié)合的單克隆抗體，選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞后，還要將該雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的特異性抗體與人的正常肺部細(xì)胞混合培養(yǎng)；單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)，靈敏度高。