Question

【題目】下圖為獲得抗除草劑轉(zhuǎn)基因玉米A的技術(shù)路線，含有內(nèi)含子的報告基因只能在真核生物中正確表達(dá)，其產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。轉(zhuǎn)化過程中愈傷組織表面常殘留農(nóng)桿菌，會導(dǎo)致未轉(zhuǎn)化的愈傷組織可能在含除草劑的培養(yǎng)基中生長。相關(guān)敘述錯誤的是

A. 采用PCR擴(kuò)增目的基因時，設(shè)計的引物間要避免形成氫鍵

B. 為防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化，構(gòu)建表達(dá)載體需用兩種不同的限制酶

C. 檢測是否轉(zhuǎn)化成功，需要依次利用抗生素抗性基因和報告基因

D. 利用T-DNA可以將目的基因插入到農(nóng)桿菌的染色體DNA上

Answer 1

【答案】D

【解析】

據(jù)圖分析可知，質(zhì)粒上含有抗生素抗性基因，可以作為標(biāo)記基因，因此需要用含抗生素的培養(yǎng)基篩選出成功導(dǎo)入表達(dá)載體的農(nóng)桿菌。含有內(nèi)含子的報告基因只能在真核生物中正確表達(dá)，其產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色，因此可用無色物質(zhì)K處理愈傷組織并篩選出呈現(xiàn)藍(lán)色的組織，即表示基因表達(dá)載體成功導(dǎo)入到了愈傷組織細(xì)胞中。

A、采用PCR擴(kuò)增目的基因時，設(shè)計的引物應(yīng)與模板鏈結(jié)合，所以引物間不能形成氫鍵，A正確；

B、為防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化，構(gòu)建表達(dá)載體需用兩種不同的限制酶，產(chǎn)生不同的黏性末端，以防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化，B正確；

C、利用抗生素抗性基因可檢測基因表達(dá)載體是否導(dǎo)入農(nóng)桿菌，由于轉(zhuǎn)化過程中愈傷組織表面常殘留農(nóng)桿菌，會導(dǎo)致未轉(zhuǎn)化的愈傷組織可能在含除草劑的培養(yǎng)基中生長，且含有內(nèi)含子的報告基因只能在真核生物中正確表達(dá)，其產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色，所以再通過報告基因可檢測目的基因是否轉(zhuǎn)化成功，C正確；

D、農(nóng)桿菌屬于原核生物，無染色體，D錯誤。

故選D。