Question

【題目】牙周病是最常見的炎癥性口腔疾病，易造成牙齒松動(dòng)和脫落。牙周膜細(xì)胞具有自我更新和多向分化的能力，在牙周組織修復(fù)過程中具有重要作用。牙齦卟啉單胞菌（P）是牙周致病菌之一，為研究P菌對(duì)人牙周膜細(xì)胞增殖和分化的影響，研究者進(jìn)行了下列實(shí)驗(yàn)。

（1）取人體新鮮牙周膜組織塊，用____________處理制成細(xì)胞懸液，置于含____________的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，獲得4～10代牙周膜細(xì)胞。

（2）取牙周膜細(xì)胞加入P菌后共培養(yǎng)，電鏡觀察發(fā)現(xiàn)P菌能侵入牙周膜細(xì)胞并在細(xì)胞內(nèi)存活。測(cè)定細(xì)胞增殖活性，結(jié)果如下圖：

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：P菌感染人牙周膜細(xì)胞后，與對(duì)照組相比，牙周膜細(xì)胞_______（填“發(fā)生”或“未發(fā)生”）明顯的增殖改變。

（3）體外誘導(dǎo)牙周膜細(xì)胞成骨分化的過程中會(huì)形成礦化結(jié)節(jié)。為了研究P菌對(duì)人牙周膜細(xì)胞成骨分化的影響，研究者利用被P菌感染的牙周膜細(xì)胞進(jìn)行礦化誘導(dǎo)處理，分別于7d、14d、21d染色檢測(cè)牙周膜細(xì)胞礦化情況，結(jié)果如下圖：

（A：對(duì)照組；B：實(shí)驗(yàn)組；7、14、21表示天數(shù)；黑點(diǎn)表示礦化結(jié)節(jié)）

①正常牙周膜細(xì)胞能不斷分化為骨纖維細(xì)胞、成骨細(xì)胞等多種細(xì)胞，這是基因____________的結(jié)果。

②對(duì)照組的處理是____________。

③研究發(fā)現(xiàn)，成骨分化與一種特異性轉(zhuǎn)錄因子Runx2有關(guān)，P菌感染人牙周膜細(xì)胞后，該轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)水平明顯下調(diào)，由此推測(cè)，Runx2的作用是___________。

Answer 1

【答案】胰蛋白酶或膠原蛋白酶 5%CO2 未發(fā)生 選擇性表達(dá) 對(duì)未被P菌感染的牙周膜細(xì)胞進(jìn)行礦化誘導(dǎo)處理 誘導(dǎo)牙周膜細(xì)胞分化為成骨細(xì)胞

【解析】

本題實(shí)驗(yàn)研究P菌對(duì)人牙周膜細(xì)胞增殖和分化的影響。根據(jù)曲線信息可知，實(shí)驗(yàn)組數(shù)據(jù)和對(duì)照組數(shù)據(jù)相差不大；根據(jù)圖示觀察牙周膜細(xì)胞礦化情況可知，對(duì)照組的礦化比實(shí)驗(yàn)組的嚴(yán)重，說明P菌感染人牙周膜細(xì)胞后，可以抑制成骨分化。

（1）取人體新鮮牙周膜組織塊，用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理制成細(xì)胞懸液，置于含5%CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，獲得4～10代牙周膜細(xì)胞。

（2）實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：P菌感染人牙周膜細(xì)胞后，與對(duì)照組相比，牙周膜細(xì)胞的細(xì)胞增殖活性變化不大，故其未發(fā)生明顯的增殖改變。

（3）①正常牙周膜細(xì)胞能不斷分化為骨纖維細(xì)胞、成骨細(xì)胞等多種細(xì)胞，這是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果。

②根據(jù)對(duì)照實(shí)驗(yàn)的相關(guān)原則，對(duì)照組的處理是對(duì)未被P菌感染的牙周膜細(xì)胞進(jìn)行礦化誘導(dǎo)處理。

③研究發(fā)現(xiàn)，成骨分化與一種特異性轉(zhuǎn)錄因子Runx2有關(guān)，P菌感染人牙周膜細(xì)胞后，成骨分化被抑制，而該轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)水平明顯下調(diào)，由此推測(cè)，Runx2的作用是誘導(dǎo)牙周膜細(xì)胞分化為成骨細(xì)胞。