Question

【題目】如圖為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法示意圖。請回答以下問題：

(1)圖中①過程用到的工具酶的特點是________________。

(2)圖中②過程用到的工具酶是____________，該過程是基因工程最核心的步驟，即____________。

(3)圖中③過程，需使用________溶液處理農(nóng)桿菌使其成為感受態(tài)。

(4)圖中④過程的原理是____________。

(5)檢測基因工程是否成功。首先，應檢測________________________________，這是目的基因能否在真核細胞內(nèi)穩(wěn)定遺傳的關鍵；其次，利用____________法檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出相應的mRNA；最后，利用____________法檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)。

Answer 1

【答案】能識別特定的脫氧核苷酸序列并且在特定位點切開DNA分子 DNA連接酶 基因表達載體的構建 氯化鈣 植物細胞的全能性 轉(zhuǎn)基因生物的染色體上是否插入目的基因 分子雜交 抗原—抗體雜交

【解析】

據(jù)圖分析，①過程表示切割質(zhì)粒，產(chǎn)生粘性末端；②過程表示構建基因表達載體；③過程表示將目的基因?qū)�入受體細胞（農(nóng)桿菌）；④過程表示植物組織培養(yǎng)。

（1）①過程表示用限制酶切割質(zhì)粒產(chǎn)生粘性末端的過程，該過程使用的限制酶能識別特定的脫氧核苷酸序列并且在特定位點切開DNA分子。

（2）②過程表示構建基因表達載體的過程，是基因工程的核心步驟，該過程需要DNA連接酶將外源基因（目的基因）與質(zhì)粒連接起來。

（3）圖中③過程，將目的基因?qū)�入微生物（農(nóng)桿菌）細胞常用感受態(tài)轉(zhuǎn)化法，即用氯化鈣溶液處理該細菌，處理的目的是使該細菌處于感受態(tài)。

（4）④過程表示植物組織培養(yǎng)，其原理是植物細胞的全能性。

（5）目的基因分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術。