Question

根據(jù)學(xué)過(guò)的知識(shí)回答下列問(wèn)題：

(1)商品化植酸酶主要來(lái)自微生物。在產(chǎn)酶菌株篩選過(guò)程中，常在基本培養(yǎng)基中添加不溶于水的植酸鈣制成固體平板，植酸鈣被植酸酶分解后可在平板上產(chǎn)生__________，可根據(jù)其大小選擇目的菌株，所得菌株需要進(jìn)一步測(cè)定植酸酶活性�；钚詼y(cè)定可用植酸鈉作為底物，活性可用一定條件下單位時(shí)間______________表示。

(2)利用上述所得菌株制備植酸酶的流程如下圖：

發(fā)酵液―→―→含酶的發(fā)酵液―→―→―→―→純酶

　　　　　　　　　　　↓　　 ↓

菌體去除　透析液(Ⅰ)去除

Ⅰ中的主要成分為____________；Ⅱ中包含多種酸酶等多種蛋白質(zhì)。請(qǐng)寫出一種純化得到植酸酶的方法及其依據(jù)。

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________

(3)為建設(shè)基因工程菌，可用PCR等技術(shù)從上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反應(yīng)包含多次循環(huán)，每次循環(huán)包括三步：________________。反應(yīng)過(guò)程中打開模板DNA雙鏈的方法是________。

(4)除植酸酶外，微生物還應(yīng)用在________________________的生產(chǎn)中。

 

Answer 1

(1)透明圈　植酸鈉的消耗量(肌醇和磷酸的生成量)　(2)小分子雜質(zhì)

凝膠色譜法，根據(jù)蛋白質(zhì)之間分子大小、吸附性質(zhì)等差異進(jìn)行純化。

電泳法，根據(jù)蛋白質(zhì)之間電荷、分子大小等差異進(jìn)行純化。

(3)變性，復(fù)性，延伸　加熱

(4)蛋白酶，脂肪酶，纖維素酶

本題考查對(duì)微生物的分離和培養(yǎng)，蛋白質(zhì)的純化，酶活性鑒定等知識(shí)，結(jié)合實(shí)際應(yīng)用。