Question

【題目】為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某生物興趣小組測定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌的分離等工作�；卮鹣铝袉栴}：

（1）實(shí)驗(yàn)室常用牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌，牛肉膏能提供的主要營養(yǎng)有 ___。一般用____瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)酵母菌。

（2）如圖，該小組采用的是 _____________分離水樣中的細(xì)菌。操作時(shí)，接種環(huán)通過____滅菌，在第二次及以后的操作時(shí)，總是從上一次的末端開始，這樣做的目的是 ____。

（3）該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中細(xì)菌含量。根據(jù)培養(yǎng)皿上菌落的平均數(shù)可以計(jì)算河水中該細(xì)菌的密度，但計(jì)算的數(shù)據(jù)要比實(shí)際活菌的數(shù)目少，原因是____。除了上述的活菌計(jì)數(shù)法外， ________________也是測定微生物數(shù)量的常用方法。

（4）該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。分析其原因是： ___________________________________________________________________ 。

Answer 1

【答案】碳源、氮源、磷酸鹽和維生素 麥芽汁 平板劃線法 灼燒 將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落 當(dāng)兩個(gè)或者多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)平板上觀察到的是一個(gè)菌落 顯微鏡直接計(jì)數(shù) 振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液的溶解氧的含量，同時(shí)可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率

【解析】

1.微生物常見的接種的方法：

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

2.劃線分離操作中的有關(guān)問題：

①在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)，在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)。

	第一次灼燒	每次劃線之前灼燒	劃線結(jié)束灼燒
目的	避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)基	殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種	殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染或感染操作者

②在灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后再進(jìn)行劃線，以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。

③在進(jìn)行第二次以及其后的劃線操作時(shí)'要從上一次劃線的末端開始劃線。每次劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。

（1）實(shí)驗(yàn)室常用牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌，牛肉膏能提供的主要營養(yǎng)有碳源、氮源、磷酸鹽和維生素。培養(yǎng)酵母菌一般用麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基。

（2）據(jù)圖分析可知，圖示接種方法為平板劃線法；對接種環(huán)常用的滅菌方法是灼燒滅菌，在第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線的目的是將聚集的菌體逐漸稀釋分散以便獲得由單個(gè)細(xì)胞繁殖而來的菌落。

（3）菌落是由一個(gè)細(xì)胞在固體培養(yǎng)基上繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群，因此單菌落可以看成一個(gè)種群；當(dāng)兩個(gè)或者多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)平板上觀察到的是一個(gè)菌落，所以稀釋涂布平板法計(jì)算的數(shù)據(jù)要比實(shí)際活菌的數(shù)目少；此外，顯微鏡直接計(jì)數(shù)也是測定微生物數(shù)量的常用方法。

（4）振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液的溶解氧的含量，同時(shí)可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率，因此振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。