Question

【題目】2008年諾貝爾化學獎授予了三位在研究綠色熒光蛋白(GFP)方面做出突出貢獻的科學家。綠色熒光蛋白能在藍光或紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光，這樣借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質(zhì)在細胞內(nèi)部的移動情況，幫助推斷蛋白質(zhì)的功能。下圖為我國首例綠色熒光蛋白(GFP)轉基因克隆豬的培育過程示意圖，據(jù)圖回答：

(1)圖中通過過程①②形成重組質(zhì)粒，需要限制酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制酶Ⅰ的識別序列和切點是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的識別序列和切點是—↓GATC—。在質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個切點，在目的基因的兩側各有1個酶Ⅱ的切點。

①請畫出質(zhì)粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。

______________________________________________________________________

②在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接起來________，理由是：__________________________________________________。

（2）過程③將重組質(zhì)粒導入豬胎兒成纖維細胞時，采用的方法_____________。

(3)GFP基因可以作為基因表達載體上的標記基因，其作用是__________________。

如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達的基因一起構建到載體上，獲得的轉基因克隆豬，可以解決的醫(yī)學難題是避免器官移植發(fā)生________反應。

(4)目前科學家們通過蛋白質(zhì)工程制造出了藍色熒光蛋白，黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術制造出藍色熒光蛋白過程的正確順序是：________(用數(shù)字表示)。

①推測藍色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸

②藍色熒光蛋白的功能分析和結構設計序列

③藍色熒光蛋白基因的修飾(合成)

④表達出藍色熒光蛋白

Answer 1

【答案】(1)①

②可以 因為形成的黏性末端是相同的(或是可以互補的)

(2)顯微注射法 (3)用于重組DNA的檢測和鑒定(鑒定受體細胞中是否含有目的基因) 免疫排斥

(4)②①③④

【解析】：（1）①質(zhì)粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端如圖所示：

②在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的，所以能夠連接起來．

（2）過程③將重組質(zhì)粒導入豬胎兒成纖維細胞時，采用最多也最有效的方法是顯微注射技術．

（3）目的基因能否在受體母豬體內(nèi)穩(wěn)定遺傳的關鍵是目的基因是否插入到受體細胞的染色體DNA上，這需要采用DNA分子雜交技術進行檢測才能確定．

（4）采用蛋白質(zhì)工程技術制造出藍色熒光蛋白過程的正確順序是：②藍色熒光蛋白的功能分析和結構設計序列、①推測藍色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸、③藍色熒光蛋白基因的修飾和④表達出藍色熒光蛋白．