Question

【題目】電影《我不是藥神》中的格列寧是一種治療癌癥的靶向藥物，此類靶向藥物可稱為“生物導(dǎo)彈”。利用單克隆抗體來診斷和治療癌癥可能會(huì)成為攻克癌癥的重要手段，以下為單克隆抗體制備流程圖：

（1）若該圖中的單克降抗體與藥物結(jié)合制成“生物導(dǎo)彈”治療腸癌，則圖中特定抗原通常是_________。靶向藥物比普通的化療藥物療效高、毒副作用小是因?yàn)?/span>______________________。

（2）圖中誘導(dǎo)細(xì)胞融合時(shí)常用的化學(xué)試劑是_____________，選擇性培養(yǎng)基上未融合的親本細(xì)胞和_____________的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有__________才能生長。

（3）近年來，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)丁酸鈉對(duì)雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體有一定的影響，某科研小組進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如下表：

丁酸鈉對(duì)雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體的影響

丁酸鈉的濃度（mmo1/L）	時(shí)間（h）
	48	96	144
0	1∶320	1∶640	1∶1200
0．25	1∶320	1∶1280	1∶2500
0．5	1∶160	1∶2500	1∶2500
0．75	1∶320	1∶320	1∶640

注：（表中比值表示抗體效價(jià)，1：#中#值越高表明越有利于抗體的產(chǎn)生）

該實(shí)驗(yàn)過程中培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)瓶放在了含的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，的主要作用是___________，該實(shí)驗(yàn)的自變量為________________。在該實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上，請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)：探究培養(yǎng)時(shí)間為144h，促進(jìn)雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體的丁酸鈉的最適濃度。

簡述設(shè)計(jì)思路：_______________________。

Answer 1

【答案】（腸）癌細(xì)胞（膜）表面的蛋白質(zhì) 既不損傷正常細(xì)胞，又減少了用藥劑量 聚乙二醇 融合的具有同種核的細(xì)胞 融合的雜種細(xì)胞 維持培養(yǎng)液的pH 丁酸鈉的濃度和培養(yǎng)時(shí)間 在丁酸鈉濃度范圍內(nèi)，設(shè)置系列更小濃度梯度實(shí)驗(yàn)，培養(yǎng)時(shí)間144h，其余條件與原實(shí)驗(yàn)相同，檢測(cè)各組抗體效價(jià)。（能夠正確體珂自變量的控制即濃度范圍和梯度、無關(guān)變量的控制、因變量檢測(cè)指標(biāo)）

【解析】

1、單克隆抗體的制備

（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。

（2）獲得雜交瘤細(xì)胞

①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合；

②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。

（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)

（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖

（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取

2、單克隆抗體的應(yīng)用

（1）作為診斷試劑，具有準(zhǔn)確、高效、簡易、快速的優(yōu)點(diǎn)。

（2）用于治療疾病和運(yùn)載藥物。

（1）單克隆抗體在癌癥治療中可作為“生物導(dǎo)彈”，單克隆抗體有兩個(gè)V區(qū)，其中一個(gè)V區(qū)可以識(shí)別癌細(xì)胞表面特定的抗原（癌細(xì)胞表面的蛋白質(zhì)），另一個(gè)V區(qū)可以和T細(xì)胞、抗癌藥物、放射性物質(zhì)等結(jié)合，使其定向殺傷癌細(xì)胞，將癌細(xì)胞消滅掉而不影響正常細(xì)胞，所以療效高，毒副作用小。

（2）誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素有電激、聚乙二醇（PEG）、滅活的病毒等。若該過程是制備單克隆抗體，在誘導(dǎo)細(xì)胞融合中，所形成的融合細(xì)胞有兩兩融合細(xì)胞3種：AA型、BB型、AB型，用來培養(yǎng)的融合細(xì)胞應(yīng)該是AB型的雜交瘤細(xì)胞，從中選擇出它的方法是用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，同種自身融合的細(xì)胞都不能存活，存活生長的是異種細(xì)胞融合的雜交細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是：既能無限繁殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。

（3）細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含有5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，其中CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH。從表格中看出，實(shí)驗(yàn)處理不同的素是丁酸鈉的濃度和處理時(shí)間，是實(shí)驗(yàn)的自變量。檢測(cè)的指標(biāo)是抗體效價(jià)為因變量。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，培養(yǎng)時(shí)間為144小時(shí)，丁酸鈉的濃度為0.25～0.5 mmo1/L時(shí)，抗體效價(jià)最高。在這個(gè)濃度范圍內(nèi)，為探究更適宜的濃度，可以設(shè)置系列更小濃度梯度的實(shí)驗(yàn)相互對(duì)照，按照單克隆抗體的制備過程，在雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)液中，分別加入等量的不同濃度的丁酸鈉溶液，再加入等量的同種雜交瘤細(xì)胞，在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)144小時(shí)，檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組抗體的效價(jià)，確定較適濃度。