【題目】草魚病毒性出血病是由草魚呼腸弧病毒(GCRV)引起的，草魚患病后死亡率非常高，目前尚未找到防治藥物，該問(wèn)題一直是草魚養(yǎng)殖的“瓶頸”，科學(xué)家嘗試制備核酸疫苗打破該“瓶頸”，下圖是通過(guò)基因工程方法將PV7雙基因與某質(zhì)粒連接，并通過(guò)草魚攻毒實(shí)驗(yàn)檢測(cè)免疫保護(hù)效果過(guò)程示意圖�；卮鹣铝袉�(wèn)題：

草魚病毒性出血病核酸疫苗實(shí)驗(yàn)魚的死亡率和免疫保護(hù)率記錄表

組別

疫苗注射量

實(shí)驗(yàn)魚數(shù)

死亡魚數(shù)

死亡率

免疫保護(hù)率

1

10μg

20尾

0尾

0

100%

2

30μg

20尾

0尾

0

100%

3

60μg

20尾

1尾

5%

95%

空載體

30μg

20尾

6尾

30%

70%

對(duì)照

0

20尾

20尾

100%

0

[注：1.圖中P10和P11為啟動(dòng)子，箭頭表示轉(zhuǎn)錄方向 2.PV71和PV72為草魚呼腸弧病毒外殼蛋白基因(DNA片段）]

（1）DCRV的遺傳物質(zhì)是雙鏈RNA，可通過(guò)設(shè)計(jì)一對(duì)引物，通過(guò)_______技術(shù)獲取大量的PV7基因。

（2）制備草魚病毒性出血病核酸疫苗時(shí)需將PV7雙基因與質(zhì)粒進(jìn)行連接，將兩個(gè)PV7基因先后連接到質(zhì)粒上時(shí)切割質(zhì)粒所使用的限制酶_____(填“相同”或“不同”），這樣做的目的有利于____________。

（3）攻毒實(shí)驗(yàn)檢測(cè)是指將不同濃度的核酸疫苗導(dǎo)入草魚體內(nèi)，通過(guò)轉(zhuǎn)錄和翻譯產(chǎn)生草魚呼腸弧病毒外殼蛋白，使草魚生成抗體和_____細(xì)胞，同時(shí)給草魚注入相同濃度的GCRV，統(tǒng)計(jì)草魚免疫保護(hù)率，實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明__________，導(dǎo)入空載體(普通質(zhì)粒)的草魚免疫保護(hù)率到70%，但草魚體內(nèi)并未檢測(cè)到抗體水平的明顯增加，可能原因的是_________________。

（4）核酸疫苗注射入草魚_________后，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)PV7基因在啟動(dòng)子的驅(qū)動(dòng)下持續(xù)表達(dá)，至第49天核酸疫苗仍沒(méi)有被降解，仍能檢測(cè)到PV7基因的轉(zhuǎn)錄，綜上所述，與常規(guī)的基因工程生產(chǎn)的蛋白質(zhì)疫苗相比，核酸疫苗所具備的優(yōu)點(diǎn)______________。

【答案】 PCR 不同 提高核酸疫苗構(gòu)建的成功率 記憶 核酸疫苗起到了保護(hù)草魚、預(yù)防草魚病毒性出血病的作用 導(dǎo)入草魚體內(nèi)的空載體(普通質(zhì)粒)能提高草魚的非特異性免疫能力 內(nèi)環(huán)境 抗原性強(qiáng)、保護(hù)時(shí)間長(zhǎng)、安全性好、制備和運(yùn)輸方便等

【解析】試題分析：分析題圖：圖中P10和PH為啟動(dòng)子，箭頭表示轉(zhuǎn)錄方向．PV71和PV72為GCRV外殼蛋白基因（DNA片段）。分析表格：組別5是對(duì)照組，與對(duì)照組相比，注射疫苗量在10ug～60ug時(shí)，草魚病毒性出血病核酸疫苗實(shí)驗(yàn)魚的死亡率都幾乎為0，即免疫保護(hù)率為95-%100%；組別4注射導(dǎo)入普通質(zhì)粒的草魚免疫保護(hù)率達(dá)到了70%。

（1）GCRV的遺傳物質(zhì)是雙鏈RNA，因此需要設(shè)計(jì)一對(duì)引物，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，通過(guò)PCR技術(shù)獲得大量的PV7基因。

（2）由圖可知，啟動(dòng)子P10能啟動(dòng)PV71基因的轉(zhuǎn)錄，啟動(dòng)子PH能啟動(dòng)PV72基因的轉(zhuǎn)錄，因此為了防止連接的位置有誤，提高核酸疫苗構(gòu)建的成功率，應(yīng)使用不同的限制酶切割PV71和PV72基因，也需要不同的限制酶先后兩次切割質(zhì)粒，再將兩個(gè)PV7基因先后連接到質(zhì)粒上。

（3）基因控制蛋白質(zhì)的合成包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)過(guò)程，因此PV7將通過(guò)轉(zhuǎn)錄和翻譯過(guò)程產(chǎn)生GCRV外殼蛋白（抗原），受到抗原刺激后，草魚體內(nèi)產(chǎn)生抗體和記憶B細(xì)胞；然后還要給各組草魚注射等量的相同濃度的GCRV，觀察統(tǒng)計(jì)草魚的免疫保護(hù)率，實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明核酸疫苗起到了保護(hù)草魚、預(yù)防草魚病毒性出血病的作用；組別4注射導(dǎo)入普通質(zhì)粒的草魚免疫保護(hù)率達(dá)到了70%，但是與組別5比較魚體內(nèi)并未檢測(cè)到抗體水平的明顯增加，可能的原因是導(dǎo)入草魚體內(nèi)的普通質(zhì)粒能提高草魚的非特異性免疫能力。

（4）核酸疫苗注射一定是進(jìn)入草魚內(nèi)環(huán)境中。核酸疫苗具有抗原性強(qiáng)、保護(hù)時(shí)間長(zhǎng)、安全性好、制備和運(yùn)輸方便等優(yōu)點(diǎn)。

練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】萌發(fā)的小麥種子中的淀粉酶主要有α－淀粉酶（在 pH<3.6 時(shí)迅速失活，但耐熱）、β－淀粉酶（不耐 熱，70℃條件下 15min 后就失活，但耐酸）。以下是以萌發(fā)的小麥種子為原料來(lái)測(cè)定α－淀粉酶催化效率的實(shí)驗(yàn)， 請(qǐng)回答下列與實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問(wèn)題。

[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯測(cè)定 40℃條件下α－淀粉酶的催化效率。

[實(shí)驗(yàn)材料]萌發(fā) 3 天的小麥種子。

[主要器材]麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)溶液、5％淀粉溶液、斐林試劑、蒸餾水、恒溫水浴鍋、試管等。

[實(shí)驗(yàn)步驟]

（1）制備不同濃度麥芽糖溶液，與斐林試劑生成標(biāo)準(zhǔn)顏色。取 7 支潔凈試管編號(hào)，按下表中所示加入試劑，而后 將試管置于 60℃水浴中加熱 2min，取出后按編號(hào)排序。

表中 Z 代表的數(shù)值是。

（2）以萌發(fā)的小麥種子制取淀粉酶溶液，將裝有淀粉酶溶液的試管置于，取出后迅速冷卻，得到α－淀粉酶溶液。

（3）取 A、B、C、D 四組試管分別作以下處理：

（4）將 Al 和 Bl 試管中溶液加入到 E1 試管中，A2 和 B2 溶液加入到 E2 試管中，A3 和 B3 溶液加入到 E3 試管中．C、 D 試管中的溶液均加入到 F 試管中，立即將 E1、E2、E3、F 試管在 40℃水浴鍋中保溫一段時(shí)間。然后分別加入 2mL 斐林試劑，并經(jīng)過(guò) 60℃水浴中加熱 2min 后，觀察顏色變化。

[結(jié)果分析]將 E1、E2、E3 試管中的顏色與試管進(jìn)行比較得出麥芽糖溶液濃度，并計(jì)算出α－淀粉酶催化效率前平均值。

[討論]

①實(shí)驗(yàn)中 F 試管所起的具體作用是排除對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾，從而對(duì)結(jié)果進(jìn)行校正。

②若要測(cè)定β－ 淀粉酶的活性，則需要對(duì)步驟二進(jìn)行改變，具體的操作是將淀粉酶溶液，從而獲得β－淀粉酶。

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】從顯微鏡下看到一個(gè)正在分裂的動(dòng)物細(xì)胞，如圖所示，則此動(dòng)物的初級(jí)卵母細(xì)胞中，四分體數(shù)、染色單體數(shù)、DNA分子數(shù)，染色體數(shù)依次是（　�。�

A. 3，6，6，6

B. 3，12，12，6

C. 3，6，6，12

D. 3，12，12，12

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】下面是某同學(xué)在“觀察植物細(xì)胞的有絲分裂”實(shí)驗(yàn)中觀察到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，下列分析錯(cuò)誤的是

A. 在整個(gè)過(guò)程中，①所處的時(shí)期細(xì)胞中染色體數(shù)目最多

B. 秋水仙素誘導(dǎo)多倍體的形成主要發(fā)生在細(xì)胞②所處時(shí)期

C. 細(xì)胞③處于觀察染色體形態(tài)和數(shù)目的最佳時(shí)期

D. ②④所處時(shí)期細(xì)胞中染色體與DNA數(shù)量之比均為1:2

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】人體組織液中的O2要進(jìn)入組織細(xì)胞中參與氧化分解有機(jī)物，這些氧化分子需要通過(guò)幾層由磷脂分子組成的膜（ ）

A. 2 B. 5 C. 3 D. 6

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】[選修3—現(xiàn)代生物科技專題]

以下是科學(xué)家采用不同方法培育良種牛的過(guò)程，a—h為操作過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖回答有關(guān)問(wèn)題：

（1）“試管�！奔夹g(shù)的操作流程是__________（用字母和“→”表示）圖中數(shù)字標(biāo)號(hào)代表的結(jié)構(gòu)名稱是①

__________③__________。

（2）圖中用到的激素是促性腺激素，其目的是__________，經(jīng)受精后可得到早期胚胎。用某染料鑒定胚胎細(xì)胞是否為活細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)活胚胎細(xì)胞不能被染色，其原因是活細(xì)胞膜_____________________________。

（3）過(guò)程h常用的方法是___________________。為了能確定目的基因已經(jīng)導(dǎo)人到受精卵，相應(yīng)的運(yùn)載體需要有__________以便于進(jìn)行檢測(cè)。

（4）若要獲得遺傳物質(zhì)完全相同的兩個(gè)新個(gè)體，可對(duì)發(fā)育到_____階段的早期胚胎進(jìn)行_______處理，再植入到受體內(nèi)。

（5）受體母牛必須和供體牛屬于同一物種。移植后的胚胎能在受體子宮中存活的生理基礎(chǔ)是________。

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】下列物質(zhì)跨膜運(yùn)輸?shù)姆绞綄儆诎痰氖?/span>

A. 突觸前膜釋放神經(jīng)遞質(zhì)

B. mRNA從細(xì)胞核轉(zhuǎn)移到核糖體上

C. 小腸上皮細(xì)胞吸收葡萄糖

D. 變形蟲攝取食物顆粒

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】某DNA分子復(fù)制三次后，所得到的第四代DNA分子中，含有第一代DNA中脫氧核苷酸鏈的條數(shù)是（ ）

A. 1條B. 2條C. 4條D. 8條

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】某研究者用抗原（A）分別免疫3只同種小鼠（X、Y和Z），每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)（能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)），結(jié)果如下圖所示。

若要制備雜交瘤細(xì)胞，需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞（染色體數(shù)目為40條），并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞（染色體數(shù)目為60條）按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè)，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞。

回答下列問(wèn)題：

（1）制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí)，所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過(guò) 次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是 小鼠，理由是 。

（2）細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交廇細(xì)胞外，可能還有 ，體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是 。

（3）雜交瘤細(xì)胞中有 個(gè)細(xì)胞核，染色體數(shù)目最多是 條。

（4）未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是 。

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