Question

【題目】Ⅰ.如圖是以鮮蘋果汁為原料利用發(fā)酵瓶制作果酒和果醋的過程簡(jiǎn)圖，分析并回答：

（1）過程甲中使用的微生物是__________。在鮮蘋果汁裝入發(fā)酵瓶時(shí)，要留有大約__________的空間。經(jīng)過10～12天后，在酸性條件下用重鉻酸鉀檢測(cè)樣液，如果顏色變?yōu)?/span>__________色，說明產(chǎn)生了酒精。

（2）過程乙中使用的微生物是__________，可以從食醋中分離純化獲得，步驟如下：

第一步：配制固體培養(yǎng)基。

第二步：對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，其方法是______________________________。

第三步：接種。

第四步：培養(yǎng)。溫度控制在__________℃范圍內(nèi)。

第五步：挑選符合要求的菌落。

（3）在__________________的條件下，如果缺少糖源，乙中的微生物將甲過程的產(chǎn)物變?yōu)?/span>__________，再將其變?yōu)?/span>__________。

Ⅱ.下表是某同學(xué)列出的分離土壤中微生物培養(yǎng)氈的配方，據(jù)此回答下列問題：

培養(yǎng)基配方
KH2PO4	1.4g
Na2HPO4	2.1g
MgS04·7H20	0.2g
葡萄糖	10.0g
尿素	1.0g
瓊脂	15.0g
將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL

（1）該培養(yǎng)基中提供氮源的物質(zhì)是___________，細(xì)菌能利用該氮源是由于體內(nèi)能合成___________酶，將尿素分解成___________，使培養(yǎng)基的pH值___________（升高/降低）

（2）在對(duì)分離的能分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行鑒定時(shí)，還需在培養(yǎng)基中加入________________指示劑，若指示劑變___________，說明有目的菌株存在。

（3）為了測(cè)定微生物的數(shù)量，接種時(shí)應(yīng)采用法，某同學(xué)在4個(gè)培養(yǎng)基上分別接種稀釋倍數(shù)為106的土壤樣液O.lmL，培養(yǎng)后菌落數(shù)分別為180、155、176、129個(gè)，則每毫升原土壤液中上述微生物的數(shù)量為___________，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)往往比實(shí)際活菌數(shù)___________（填“低”“高”“基本一致”），原因是___________。

Answer 1

【答案】 酵母菌 1/3 灰綠 醋酸(桿)菌 高壓蒸汽滅菌 30～35 氧氣充足（有氧） 乙醛 醋酸 【答題空10】尿素 脲(催化尿素分解的) 氨 升高 酚紅 紅 1.6×109 低 當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落

【解析】試題分析：據(jù)圖分析，甲表示果酒發(fā)酵，參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型；乙表示果醋發(fā)酵，參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。根據(jù)表格分析，該培養(yǎng)基含有瓊脂，為固體培養(yǎng)基，含有的唯一氮源是尿素。能夠分解利用尿素的細(xì)菌，其細(xì)胞內(nèi)含有脲酶，可以把尿素分解成氨，提供N源，進(jìn)一步利用，只含有尿素作為N源的培養(yǎng)基對(duì)微生物具有選擇作用。

（1）根據(jù)以上分析已知，參與過程甲的微生物是酵母菌。在鮮蘋果汁裝入發(fā)酵瓶時(shí)，要留有大約1/3的空間，以防止發(fā)酵液溢出。經(jīng)過10～12天后，在酸性條件下用重鉻酸鉀檢測(cè)樣液，如果顏色由橙色變?yōu)榛揖G色，說明產(chǎn)生了酒精。

（2）乙是果醋發(fā)酵過程，參與果醋制作的微生物是醋酸（桿）菌。固體培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法滅菌；醋酸菌生存的適宜溫度是30-35℃，因此培養(yǎng)時(shí)要將溫度控制在30-35℃范圍內(nèi)。

（3）在氧氣充足（有氧）的條件下，如果缺少糖源，醋酸菌可將乙醇變?yōu)橐胰�，再將乙醛變�(yōu)榇姿帷?/span>

Ⅱ.（1）根據(jù)以上分析已知，該培養(yǎng)基以尿素為唯一氮源；細(xì)菌能利用該氮源是由于體內(nèi)能合成脲酶，將尿素分解成氨，從而使培養(yǎng)基的pH值升高。

（2）在對(duì)分離的能分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行鑒定時(shí)，還需在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若指示劑變紅，說明有目的菌株存在。

（3）純化微生物可以用稀釋涂布法和平板劃線法，其中稀釋涂布法能用于微生物的計(jì)數(shù)．1毫升原土壤樣液中上述微生物數(shù)量=（180+155+176+129）÷4×106×10=1.6×109個(gè)；用稀釋涂布平板法進(jìn)行微生物的計(jì)數(shù)，但統(tǒng)計(jì)的數(shù)量比實(shí)際數(shù)量會(huì)偏少，原因是當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。