Question

PCR技術(shù)是一種DNA的擴(kuò)增技術(shù)，操作步驟簡介如下：

第一步：準(zhǔn)備反應(yīng)式溶液和模塊DNA。

A．配制聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)溶液：

配方：按如下比例進(jìn)行配制：蒸餾水100、緩沖溶液15、氯化鎂溶液8、引物13、引物23、DNA聚合酶、礦物油1(防止聚合酶在凍結(jié)時(shí)受傷害)；dATP、dGTP、dCTP、dTTP每一種各加5。

B．準(zhǔn)備要拷貝的DNA：

提取準(zhǔn)備要拷貝的DNA

(如可以用一牙簽輕刮口腔內(nèi)壁，將牙簽放入蒸餾水中搖動(dòng)。加熱蒸餾水沸騰，使細(xì)胞破碎放出DNA。用離心機(jī)離心后，去除蒸餾水中較大的細(xì)胞碎片。這時(shí)上清液中就有了較純的DNA。)

第二步：聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。

①將要拷貝的DNA“B”放入反應(yīng)液“A”中。

②水浴加熱。首先，94 ℃，使DNA雙螺旋解旋，歷時(shí)1 min；然后，56 ℃，使引物結(jié)合到DNA上，歷時(shí)90 s；最后，72 ℃，用聚合酶使DNA拷貝，歷時(shí)90 s。③重復(fù)步驟②。每重復(fù)一次，即完成一次拷貝。

分析回答下列問題：

(1)以上材料可以說明（　�。�

A．DNA的復(fù)制必須在活細(xì)胞內(nèi)才能完成

B．DNA能指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成

C．在合適的條件下，非細(xì)胞環(huán)境也能進(jìn)行DNA復(fù)制

D．PCR技術(shù)是一種無性生殖技術(shù)

(2)為什么要加入兩種引物。________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

引物的作用是什么？________________________________________________________________________

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(3)PCR技術(shù)中用到的DNA聚合酶，取自生長在溫泉中的一種細(xì)菌，就PCR技術(shù)來講，你認(rèn)為使用這種細(xì)菌中提取的酶較普通的動(dòng)植物體內(nèi)提取的DNA聚合酶的優(yōu)勢(shì)是________________________________________________________________________

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Answer 1

【答案】

（1）C  （2）DNA分子兩條鏈?zhǔn)浅史聪蚱叫械�，DNA聚合酶不能從頭合成DNA分子，只能從3’端到5’端延伸，而引物也是一段核苷酸序列，與DNA分子雙鏈中的一條鏈互補(bǔ)可以引導(dǎo)DNA分子的復(fù)制

（3）較高溫下不會(huì)變性失活

【解析】

試題分析：（1）PCR說明在體外也能將DNA進(jìn)行大量復(fù)制，故選C。

（2）PCR過程DNA聚合酶的作用是將游離的脫氧核苷酸加到DNA片段上，不能從頭合成DNA分子，故必須需要一段引物，引物是一段核苷酸序列，與DNA分子雙鏈中的一條互補(bǔ)鏈互補(bǔ)，可以引導(dǎo)DNA分子的復(fù)制。

（3）PCR因?yàn)樾枰�在高溫下變性，這種酶耐高溫，與普通酶相比在較高溫下不會(huì)變性失活。

考點(diǎn)：本題考查PCR相關(guān)知識(shí)，意在考察考生對(duì)知識(shí)點(diǎn)的理解掌握和把握知識(shí)點(diǎn)間內(nèi)在聯(lián)系綜合運(yùn)用能力。