Question

【題目】如圖表示利用基因工程制各抗體的基本途徑，據(jù)圖回答下列問題是：

（1）上圖中的細(xì)胞①是_________細(xì)胞，過程②是________過程。

（2）抗體基因可以通過PCR技術(shù)擴(kuò)增獲得。首先從基因組數(shù)據(jù)庫中查詢需合成的抗體基因mRNA的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列設(shè)計(jì)合成________________，并以上圖中的______________為模板直接進(jìn)行PCR擴(kuò)增。若下圖為第一輪循環(huán)產(chǎn)生的產(chǎn)物，請(qǐng)繪出以a鏈和b鏈為模板經(jīng)PCR擴(kuò)增的產(chǎn)物 ________________。（要求：在產(chǎn)物中標(biāo)出a、b鏈和引物的種類）

（3）圖中將目的基因?qū)�入大腸桿菌的過程中，________（填“要”或“不需要”）利用Ca處理大腸桿菌制備感受態(tài)細(xì)胞，原因__________________________________________。

（4）為檢測目的基因在大腸桿菌中是否翻譯，可從大腸桿菌中提取___________，進(jìn)行_______雜交實(shí)驗(yàn)。

Answer 1

【答案】漿細(xì)胞 逆轉(zhuǎn)錄 引物 c DNA 不需要 噬菌體可以侵染大腸桿菌，將重組DNA分子注入大腸桿菌 抗體 抗原-抗體

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

圖示①是漿細(xì)胞，②是逆轉(zhuǎn)錄。

（1）通過分析可知，圖中的細(xì)胞①是漿細(xì)胞，過程②是逆轉(zhuǎn)錄過程。

（2）從基因組數(shù)據(jù)庫中查詢抗體基因mRNA的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列設(shè)計(jì)合成引物，用于PCR擴(kuò)增。并以上圖中的cDNA為模板直接進(jìn)行PCR擴(kuò)增。圖中為第1輪循環(huán)產(chǎn)生的產(chǎn)物，則以a鏈和b鏈為模板經(jīng)PCR擴(kuò)增的產(chǎn)物如圖：

（3）不需要利用Ca2+處理大腸桿菌制備感受態(tài)細(xì)胞，原因是噬菌體可以侵染大腸桿菌，將重組DNA分子注入大腸桿菌。

（4）檢測目的基因在大腸桿菌中是否翻譯成功，可從大腸桿菌中提取抗體，進(jìn)行抗原-抗體雜交實(shí)驗(yàn)。