Question

【題目】研究發(fā)現(xiàn)，利用抗體抑制腫瘤細(xì)胞表面的CD47蛋白的活性，可促進(jìn)巨噬細(xì)胞吞噬腫瘤細(xì)胞。為制備抗CD47抗體，研究人員先利用基因工程方式制備CD47蛋白，圖為含CD47基因的外源DNA、質(zhì)粒DNA的有關(guān)信息， EcoRI、BamHI、SalI、XhoI 均為限制酶，Kanr、Tcr分別為卡那霉素抗性基因、四環(huán)素抗性基因。

（1）為了形成合適的重組質(zhì)粒，應(yīng)該選用限制酶________切割外源DNA和質(zhì)粒DNA。

A．EcoRI和XhoI B．BamHI和XhoI

C．EcoRI和SalI D．BamHI和SalI

（2）重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌的成功率很低，需經(jīng)篩選才能獲得導(dǎo)入成功的大腸桿菌，以下菌種為所需菌種的是________。

A．能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長的菌種

B．能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長的菌種

C．能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長、而不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長的菌種

D．能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長、而不能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長的菌種

下圖為制備抗CD47單克隆抗體的過程示意圖，A、B、C 表示細(xì)胞，①、②表示過程。

（3）給小鼠注射的抗原物質(zhì)是________________，該物質(zhì)被小鼠的免疫細(xì)胞識別，引起下列四項(xiàng)中的________過程，形成細(xì)胞A。

A．天然免疫 B．非特異性免疫 C．細(xì)胞免疫 D．體液免疫

（4）過程①表示________________過程，形成的細(xì)胞C稱為________________。過程②表示用________________技術(shù)獲得大量細(xì)胞。共同培養(yǎng)巨噬細(xì)胞和癌細(xì)胞，加入不同濃度的抗CD47抗體，測定巨噬細(xì)胞吞噬癌細(xì)胞的吞噬系數(shù)，得到了如圖所示的結(jié)果。

（5）結(jié)合圖及題干信息分析，以下描述正確的是________（多選）。

A．癌細(xì)胞表面的CD47蛋白能影響巨噬細(xì)胞吞噬癌細(xì)胞

B．較高濃度的抗CD47抗體有利于巨噬細(xì)胞吞噬癌細(xì)胞

C．使用抗CD47抗體治療癌癥需要嚴(yán)格控制抗體的濃度

D．抗CD47抗體能有效抑制癌細(xì)胞的增殖達(dá)到治療目的

Answer 1

【答案】B C CD47（CD47蛋白） D 細(xì)胞融合 雜交瘤細(xì)胞 細(xì)胞培養(yǎng)（體外培養(yǎng)） ABC

【解析】

限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。標(biāo)記基因的作用是用于重組DNA的鑒定和選擇，以便把含有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來。

（1）由圖可知，若用EcoRI和XhoI切割目的基因，則當(dāng)用EcoRI和XhoI切割質(zhì)粒時，質(zhì)粒上的兩個標(biāo)記基因均被破壞，故構(gòu)建重組質(zhì)粒不能選用EcoRI和XhoI，A錯誤；用BamHI和XhoI構(gòu)建重組質(zhì)粒時，既可以獲得完整的目的基因，又可以獲得含有卡那霉素抗性基因的重組質(zhì)粒，B正確；由于目的基因內(nèi)含有SalI酶切位點(diǎn)，所以不能用該酶切割目的基因，CD錯誤。

故選B。

（2）根據(jù)（1）中分析可知，重組質(zhì)粒中的四環(huán)素抗性基因被破壞，而卡那霉素抗性基因未被破壞，所以重組質(zhì)粒導(dǎo)入成功的大腸桿菌含有卡那霉素抗性基因，而不含四環(huán)素抗性基因，故該大腸桿菌能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長、而不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長，綜上分析，C正確，ABD錯誤。

故選C。

（3）實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖侵苽淇笴D47單克隆抗體，所以注射的抗原應(yīng)為CD47蛋白，抗原進(jìn)入小鼠體內(nèi)，可引起小鼠的體液免疫，產(chǎn)生抗體。故D正確，ABC錯誤。

故選D。

（4）A細(xì)胞是從經(jīng)過免疫的小鼠體內(nèi)提取的漿細(xì)胞，B細(xì)胞為小鼠的骨髓瘤細(xì)胞，在誘融劑的作用下可融合為雜交瘤細(xì)胞，故①過程為細(xì)胞融合，形成的細(xì)胞C為雜交瘤細(xì)胞，形成的雜交瘤細(xì)胞還需要經(jīng)過篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，再將雜交瘤細(xì)胞經(jīng)過動物細(xì)胞培養(yǎng)可獲得大量雜交瘤細(xì)胞，并能產(chǎn)生大量抗體。

（5）根據(jù)柱形圖可知，加入較高濃度的抗CD47抗體的實(shí)驗(yàn)組與對照組相比巨噬細(xì)胞吞噬癌細(xì)胞的吞噬系數(shù)較高，說明癌細(xì)胞表面的CD47蛋白能影響巨噬細(xì)胞吞噬癌細(xì)胞以及較高濃度的抗CD47抗體有利于巨噬細(xì)胞吞噬癌細(xì)胞，AB正確；根據(jù)圖示可知，使用25ug.mL-1抗CD47抗體的實(shí)驗(yàn)組與對照組相比巨噬細(xì)胞吞噬癌細(xì)胞的吞噬系數(shù)幾乎無差別，說明使用抗CD47抗體治療癌癥需要嚴(yán)格控制抗體的濃度，C正確；抗CD47抗體不能與癌細(xì)胞結(jié)合，針對癌細(xì)胞發(fā)揮作用的主要是效應(yīng)T細(xì)胞，D錯誤。

故選ABC。