【題目】現(xiàn)有重組質(zhì)粒甲(共含2686個堿基對,不含T-DNA)和乙,為避免基因反接,研究人員用限制酶Ⅰ和Ⅱ切割重組質(zhì)粒甲、乙,再利用所得片段構(gòu)建了重組質(zhì)粒丙(下圖所示),然后采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將丙導入胡蘿卜愈傷組織細胞。培養(yǎng)后得到轉(zhuǎn)VP1基因胡蘿卜植株。請回答:

1)構(gòu)建重組質(zhì)粒丙的目的是將VP1基因插入到________中,從而使VP1基因進入植物細胞后,能整合到染色體的DNA上。利用重組質(zhì)粒甲、乙構(gòu)建丙的過程中,用到的工具酶是____________。

2)將重組質(zhì)粒甲、乙和丙進行分組,每組只含其中一種重組質(zhì)粒,同時用限制酶Ⅰ和Ⅱ切割,結(jié)果如下表所示:

組別

切割后所得DNA片段的情況

1

只得到含有2146540個堿基對的2DNA片段

2

只得到含有54012400個堿基對的2DNA片段

3

只得到含有124001000個堿基對的2DNA片段

切割前,重組質(zhì)粒甲含有______個游離的磷酸基團,限制酶Ⅰ在重組質(zhì)粒甲中有________個切割位點,表中第_________組是切割重組質(zhì)粒丙的結(jié)果。

3)在植物組織培養(yǎng)過程中需要無菌操作,因此對外植體(離體的組織塊)要進行_____處理。用于培養(yǎng)外植體的培養(yǎng)基不適用于培養(yǎng)胚狀體,原因是_________________________

【答案】T-DNA 限制酶Ⅰ、Ⅱ和DNA連接酶 0 1 2 消毒 培養(yǎng)基中添加的植物激素(植物生長調(diào)節(jié)劑)的種類和含量比例有所不同

【解析】

基因工程的基本操作程序包括:目的基因的獲取、基因表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定。①目的基因的獲取方法:從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增、通過DNA合成儀人工合成。②基因表達載體由目的基因、啟動子、終止子、標記基因等組成。③將目的基因?qū)雱游锛毎ǔ@蔑@微注射技術(shù);將目的基因?qū)胫参锛毎ǔS棉r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,此外還有基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)胛⑸锛毎ǔS酶惺軕B(tài)細胞法。④目的基因的檢測與鑒定分為分子水平和個體水平,前者包括DNA分子雜交、分子雜交、抗原—抗體雜交法,后者進行個體水平檢測如抗蟲抗病接種實驗。

1T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞并整合到受體細胞染色體的DNA上,由圖示可知,重組質(zhì)粒甲上有目的基因VP1,沒有T-DNA,重組質(zhì)粒乙上含有T-DNA,因此構(gòu)建重組質(zhì)粒丙的目的是將VP1基因插入到T-DNA中,從而使VP1基因進入植物細胞后,能整合到染色體的DNA上,使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達。構(gòu)建重組質(zhì)粒過程需要用到的工具酶有限制酶Ⅰ、Ⅱ和DNA連接酶。

2)重組質(zhì)粒甲屬于環(huán)狀DNA分子,含2686個堿基對,在切割前含有0個游離的磷酸基團。由于每組只含其中一種重組質(zhì)粒,重組質(zhì)粒丙由重組質(zhì)粒甲、乙拼接而成,根據(jù)表格中切割后的片段堿基數(shù)可推得,第1組為重組質(zhì)粒甲、第2組為重組質(zhì)粒丙、第3組為重組質(zhì)粒乙,由于第1組重組質(zhì)粒甲被限制酶Ⅰ、Ⅱ切割后只得到含有2146540個堿基對的2DNA片段,則限制酶Ⅰ在重組質(zhì)粒甲中只有1個切點。

3)在植物組織培養(yǎng)過程中需要無菌操作,因此對外植體要進行消毒處理。用于培養(yǎng)外植體的培養(yǎng)基不適用于培養(yǎng)胚狀體,原因是培養(yǎng)基中添加的植物激素的種類和含量比例有所不同,前者利于脫分化形成愈傷組織,后者利于再分化形成胚狀體。

練習冊系列答案
相關(guān)習題

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【題目】甜菜是常用的糖料作物,下圖表示在一定光照強度下甜菜葉肉細胞的部分代謝過程示意圖(圖中ag為物質(zhì),①~⑥為反應過程),據(jù)圖回答下列問題:

1)圖中①表示根對水分的吸收,其主要方式為______________,物質(zhì)f______________。據(jù)圖分析涉及能量轉(zhuǎn)化的反應過程有______________(用圖中數(shù)字表示)。

2)甜菜根被水淹沒一段時間,葉片會缺Mg2+變黃,原因是________________。

3)引種甜菜時,常選擇日照較長,晝夜溫差較大的地區(qū)栽培,原因是__________________________。

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【題目】某肽鏈由51個氨基酸組成,如果用肽酶把其分解成1個二肽、2個五肽、3個六肽、3個七肽,若用柱形圖表示這些短肽的氨基總數(shù)的最小值(m)、肽鍵總數(shù)(n)、完全水解這些小分子肽所需水分子總數(shù)(q),正確的是

A.B.

C.D.

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【題目】下圖表示某生物膜的部分結(jié)構(gòu),圖中 A、B、C、D 表示某些物質(zhì),a、bc、d 表示物質(zhì)跨膜運輸方式。下列說法錯誤的是(

A.若是癌細胞的細胞膜,則物質(zhì) D 比正常細胞少

B.若是線粒體膜,則 b、c 運輸?shù)臍怏w分別是O2 CO2

C.人體細胞中可以用d表示 K+進入細胞

D.a 的運輸方式能體現(xiàn)細胞膜的選擇透過性

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【題目】下面四幅圖是來自于同一生物體內(nèi)的、處于四個不同狀態(tài)的細胞分裂圖。下列有關(guān)敘述中,正確的是

A. 該生物的正常體細胞中含有16條染色體

B. 與圖所示細胞中DNA含量比例為12

C. 與圖所示過程僅發(fā)生在某些器官中

D. 由圖可知,該生物一定是雄性個體

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【題目】如圖為人體組織局部示意圖(②③④⑤屬于人體體液的一部分),根據(jù)所所學知識回答下列問題(注:箭頭表示血液流動方向)

1)②為______________,④為______________

2)物質(zhì)進出細胞的方式有多種,以氧氣為例,氧從血液進入組織細胞的方式是______________;紅細胞所攜帶的氧氣至少需要經(jīng)過_____層生物膜才能被組織細胞②利用,氧氣參與有氧呼吸的第_____階段。

3)⑤中的化學組成中有HCO3、HPO42等物質(zhì),它們對于維持內(nèi)環(huán)境_____的穩(wěn)定有重要意義。目前普遍認為_________________________________調(diào)節(jié)網(wǎng)絡,是機體維持穩(wěn)態(tài)的主要調(diào)節(jié)機制。

4)血漿、組織液和淋巴三者之間既有密切關(guān)系,又有一定區(qū)別。一般情況下,④與⑤成分上的主要區(qū)別是__________________________________________。

5)內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)是指__________________________________________。

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【題目】植物的葉肉細胞依賴光照吸收O2,放出CO2的過程稱為光呼吸。下圖表示光呼吸代謝過程部分內(nèi)容,請回答下列問題:

1)在光合作用中,C5__________反應生成C3。圖中的ATP來源于光合作用的__________階段,可用于暗反應中__________過程。依圖判斷,氧氣濃度增加,與C5結(jié)合,生成乙醇酸磷酸,導致光合作用的速率__________。

2)線粒體中的NAD+來源于有氧呼吸的__________階段,線粒體中的CO2除來源于圖中所示的途徑以外,還可以由水與__________反應生成。

3)如果給植物供給H218O,18O轉(zhuǎn)移到C3的一條途徑是:H218O→C18O2→C3;18O轉(zhuǎn)移到C3的另一條途徑是:H218O→__________→C3。

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【題目】微衛(wèi)星DNA是廣泛分布于真核生物基因組中的簡單重復序列。由于重復單位和重復次數(shù)在個體間表現(xiàn)出一定的遺傳性和差異性,因此微衛(wèi)星DNA可以作為分子標記,并有著廣泛應用。

1)可以用標記的__________________為探針,與基因組文庫進行雜交篩選,然后再經(jīng)多個步驟獲取微衛(wèi)星DNA

2)擴增微衛(wèi)星DNA序列A7I0PCR反應體系中含緩沖液、模板DNA、dNTP(包含dATPdCTP、dGTP、dTTP)、引物及耐熱的DNA聚合酶。其中dNTP的作用是_____________________________; PCR技術(shù)護增目的基因的前提是_________________________,以便根據(jù)這一序列合成引物,所以引物應選用下圖中的_________(填圖中標號)。PCR的基本反應步驟為__________________________,其產(chǎn)物以_______________形式擴增。

3)根據(jù)“微衛(wèi)星DNA”的特點判斷,應用這種標記可進行的研究有________(填字母)。

①人類親子鑒定 ②調(diào)查某地大熊貓種群數(shù)量

③誘導基因突變 ④冠狀病毒遺傳物質(zhì)測序

A.①② B.②③ C.③④ D.①④

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【題目】紅樹植物健康生長需要適宜的淹水環(huán)境和鹽度。隨著底泥的淤升,華僑城濕地紅樹林生境陸化嚴重,紅樹植物長勢變差。

1)華僑城濕地紅樹林優(yōu)勢種為秋茄,平均樹高約7米,林下有零星分布的桐花樹。該濕地所有生物構(gòu)成一個_________。秋茄與桐花樹高低錯落,說明具有________結(jié)構(gòu),有利于_________。

2)通過周期性補水,模擬秋茄林的淹水生境,在研究區(qū)域的秋茄林內(nèi)設(shè)置3個補水組樣方和3個對照組樣方,對照組的處理是__________。處理相應時間后,采用__________取樣,每個樣方內(nèi)取330cm深的沉積柱樣土壤底泥,每個沉積柱以5cm間隔進行分樣,將3個沉積柱同一水平的分樣混勻,總共獲得_________份沉積物樣品。測量底泥的理化性質(zhì)如下表所示:

含水率/

鹽度/‰

對照組平均值

4020±410

189±037

補水組平均值

4246±320

212±045

補水對秋茄成林具有修復作用,推測該區(qū)紅樹植物秋茄長勢變差的主要原因是___________。

3)選取補水組和對照組中秋茄成熟葉片,測定葉綠素a、葉綠素b和類胡蘿卜素的含量(單位:mg/g)如下圖。

葉綠素a具有吸收和轉(zhuǎn)化光能的作用,葉綠素b和類胡蘿卜素具有吸收和傳遞光能的作用,圖示說明生境陸化對紅樹植物秋茄葉綠素a的損害程度________葉綠素b,而補水增強秋茄葉片對光能的________能力。

4)在晴天9:00-11:00光照充足時,選擇補水組和對照組的秋茄成熟葉片,進一步測定了光合作用各項指標,如下表所示:

凈光合速率

μmol/m2·s

胞間CO2濃度

μmol/m2·s

氣孔導度

mol/m2·s

對照組

213

38727

0086

補水組

547

3568

0085

說明補水處理有效改善了陸化秋茄林的光合作用,并且________(填不是)由于氣孔開閉導致秋茄林光合速率下降而退化。

5)秋茄林補水修復研究的意義是_____________________。

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