Question

【題目】下圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線。圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因，ampR表示氨芐青霉素抗性基因，BamHI、HindⅢ、SmaI直線所示為三種限制酶的酶切位點(diǎn)。據(jù)圖回答：

（1）圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用___________________限制酶同時(shí)酶切載體和人乳鐵蛋白基因。篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含________________的培養(yǎng)基上進(jìn)行。

（2）能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是_______（填字母代號(hào)）。

A．啟動(dòng)子 B．tetR C．復(fù)制原點(diǎn) D．ampR

（3）過(guò)程①常用的操作方法是_________（填字母代號(hào)）。

A．農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 B．大腸桿菌的鈣離子轉(zhuǎn)染法

C．顯微注射法 D．基因槍法

（4）過(guò)程②可采用的生物工程技術(shù)是_______________________。

（5）對(duì)早期胚胎進(jìn)行切割，經(jīng)過(guò)程②可獲得多個(gè)新個(gè)體。這利用了細(xì)胞的____________性。

（6）為檢測(cè)人乳鐵蛋白是否成功表達(dá)，可采用_______（填字母代號(hào)）技術(shù)。

A．核酸分子雜交 B．基因序列分析 C．抗原—抗體雜交 D．PCR

Answer 1

【答案】HindⅢ和BamHⅠ 氨芐青霉素 A C 胚胎移植技術(shù) 全能 C

【解析】

結(jié)合題意分析圖解：圖中質(zhì)粒包括四環(huán)素抗性基因、氨芐青霉素抗性基因、啟動(dòng)子、復(fù)制原點(diǎn)，以及兩個(gè)限制酶切點(diǎn)，并且兩個(gè)限制酶切點(diǎn)的位置均在四環(huán)素抗性基因上；目的基因上有三個(gè)限制酶切點(diǎn)，與質(zhì)粒對(duì)照，共有的是BamHI、HindIII。
圖中①表示目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，②表示通過(guò)胚胎移植的方式將早期胚胎移植到代孕母牛體內(nèi)。

（1）由圖中信息可知，載體上有HindⅢ和BamHⅠ酶切位點(diǎn)，目的基因上也有它們的酶切位點(diǎn)，應(yīng)用此2種酶切。當(dāng)人乳鐵蛋白基因和質(zhì)粒連接成重組質(zhì)粒后，tetR基因被人乳鐵蛋白基因隔開(kāi)，不是完整的，而ampR基因是完整的，所以篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行。

（2）能讓目的基因開(kāi)始表達(dá)的是啟動(dòng)子，啟動(dòng)子是RNA聚合酶特異性識(shí)別和結(jié)合的DNA序列，是基因的一個(gè)組成部分，控制基因表達(dá)（轉(zhuǎn)錄）的起始時(shí)間和表達(dá)的程度。

（3）將目的基因?qū)�入到�?dòng)物中常用顯微注射法。

（4）早期胚胎移入代孕牛的體內(nèi)利用的是胚胎移植的技術(shù)。

（5）對(duì)早期胚胎進(jìn)行切割，經(jīng)過(guò)程胚胎移植過(guò)程可獲得多個(gè)新個(gè)體都發(fā)育成了個(gè)體，這體現(xiàn)了細(xì)胞全能性。

（6）一般檢測(cè)目的基因是否表達(dá)里用抗原-抗體雜交的方法。