Question

【題目】普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人將地衣芽孢桿菌的α-淀粉酶基因轉(zhuǎn)入酵母菌中，經(jīng)篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種（過(guò)程如圖所示）

（1）圖1中,為達(dá)到篩選目的,平板內(nèi)的固體培養(yǎng)基應(yīng)以 作為唯一碳源。②、③過(guò)程需重復(fù)幾次,目的是 。

（2）某同學(xué)嘗試過(guò)程③的操作,其中一個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如下圖所示。該同學(xué)的接種方法是 ；根據(jù)平板菌落分布情況，請(qǐng)分析該同學(xué)存在的操作失誤 。通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌，為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在 的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。用此接種方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目 ，原因是 。

（3）以淀粉為原料,用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的適宜條件下密閉發(fā)酵,工程酵母菌發(fā)酵罐需要先排氣,其原因是 。

（4）上述工程酵母菌培養(yǎng)過(guò)程中，有關(guān)操作正確的是 。

A．玻璃刮刀用火焰灼燒進(jìn)行滅菌

B．培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進(jìn)行滅菌

C．倒平板和取菌液都必須在酒精燈火焰旁進(jìn)行

D．獲得的菌種如果需要保存，可置于37℃恒溫保存

Answer 1

【答案】（1）淀粉 篩選出真正高效利用淀粉的工程酵母菌菌種（2 分）

（2）稀釋涂布平板法 涂布不均勻 30-300 低

當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只有一個(gè)菌落 （2 分）

（3）工程酵母菌利用淀粉的速度很快，發(fā)酵產(chǎn)生CO2的速度也很快（其他合理答案也給分）（2 分）

（4）C

【解析】（1）該實(shí)驗(yàn)的目的是獲得利用淀粉的工程酵母菌菌種，所以培養(yǎng)基應(yīng)該以淀粉為唯一碳源。②、③過(guò)程需重復(fù)幾次的目的是篩選出真正高效利用淀粉的工程酵母菌菌種。

（2）圖中平板培養(yǎng)后的結(jié)果，形成了多個(gè)菌落，因此為稀釋涂布平板法，但是菌落分布不均勻，集中分布在一定區(qū)域，說(shuō)明涂布不均勻。用稀釋涂布平板法進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)時(shí)，當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品大約含有多少活菌。一般選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。用此接種方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低，原因是當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只有一個(gè)菌落。

（3）工程酵母菌利用淀粉的速度很快，發(fā)酵產(chǎn)生CO2的速度也很快，所以用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的適宜條件下密閉發(fā)酵,工程酵母菌發(fā)酵罐需要先排氣。

（4）玻璃刮刀用酒精消毒，A錯(cuò)誤；培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿前進(jìn)行滅菌，B錯(cuò)誤；倒平板和取菌液都必須在酒精燈火焰旁進(jìn)行，以防止雜菌污染，C正確；菌種的保存一般發(fā)生在低溫的環(huán)境中，D錯(cuò)誤。