Question

【題目】北極比目魚中有抗凍基因，下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過程示意圖，請回答：

（1）利用過程①的方法構(gòu)建的基因文庫是____________（填“基因組文庫”或“部分基因文庫”）。

（2）過程②中常需要使用限制酶和DNA連接酶，既能連接黏性末端又能連接平末端的DNA連接酶是_________________________。

（3）為使過程①獲取的目的基因在番茄細胞中能夠表達，在構(gòu)建表達載體時，需在目的基因的兩端加入________________________。

（4）將重組質(zhì)粒導入農(nóng)桿菌，并通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，可以將目的基因?qū)�入番茄體細胞中染色體的DNA上，其原理是__________________________________________。

（5）要確認抗凍基因是否在轉(zhuǎn)基因番茄植株中正確表達，應(yīng)檢測轉(zhuǎn)基因番茄植株中該基因的_______________是否呈陽性。

Answer 1

【答案】 部分基因文庫 T4DNA連接酶 啟動子、終止子 目的基因隨農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒上的T-DNA轉(zhuǎn)移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體DNA上 表達產(chǎn)物

【解析】本題考查基因工程,解題要點是識記基因工程的操作工具及基本操作程序

(1)用某種生物發(fā)育的某個時期的mRNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的多種互補DNA片段，是部分基因文庫

(2) 既能連接黏性末端又能連接平末端的DNA連接酶是T4DNA連接酶

(3)一個基因表達載體的組成,除了目的基因外,還必須有啟動子和終止子.

(4)因為農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞,并且整合到受體細胞染色體的DNA上,如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒上,通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用,就可以使目的基因進入植物細胞,并將其整合到受體細胞染色體的DNA上,使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達.

(5)檢測目的基因是否表達,可從轉(zhuǎn)基因生物中提取基因的表達產(chǎn)物即蛋白質(zhì),用相應(yīng)的抗體進行抗原-抗體雜交,若呈陽性,表明目的基因已成功表達.

[點睛]:本題易混點:1.關(guān)于基因文庫:包含某生物所有基因的叫該生物的基因組文庫,用mRNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的DNA片段是部分基因文庫;2.關(guān)于基因表達載體:一個基因表達載體應(yīng)包括目的基因、啟動子、終止子、標記基因;3.目的基因的檢測與鑒定中,可以利用DNA分子雜交技術(shù)，檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體上的DNA是否插入了目的基因,以及目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA,而檢測目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì),可用抗原-抗體雜交,若有雜交帶,表明目的基因已成功表達出蛋白質(zhì).