Question

【題目】如圖為分離微生物的流程示意圖，請據(jù)圖回答問題：

(1)絕大多數(shù)細(xì)菌分布在距地表約3～8 cm的土壤層，因此，土壤取樣時(shí)，一定要鏟去________；要分離土壤中分解纖維素的細(xì)菌，可以選擇____________的環(huán)境，如樹林中多年落葉形成的腐殖土。

(2)微生物培養(yǎng)時(shí)，不同的微生物需要不同的培養(yǎng)溫度和時(shí)間，細(xì)菌一般在___________℃的溫度下培養(yǎng)____________天。

(3)若要對分離的細(xì)菌做進(jìn)一步的鑒定，還需借助物理化學(xué)的方法：若要鑒定是否有分解尿素的細(xì)菌，可以在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入________指示劑，若指示劑變紅，說明培養(yǎng)基的PH升高，這樣可以鑒定這種細(xì)菌可以分解尿素；若要鑒定是否有分解纖維素的細(xì)菌，在長出菌落的培養(yǎng)基上，覆蓋________染液，10～15 min后，倒去該染液，再加入1 mol/L的NaCl溶液，加入NaCl溶液的目的是______________，15min后，也倒去該溶液，若菌落的周圍出現(xiàn)________，說明此細(xì)菌能分解纖維素。

Answer 1

【答案】 表層土壤 富含纖維素 30～37 1～2 酚紅 剛果紅 洗去未與纖維素結(jié)合的剛果紅 透明圈

【解析】（1）由于表層土壤相對干燥，小動物分布較少，所以土壤取樣時(shí)，應(yīng)先鏟去表層土3～8cm左右，再取樣；要分離土壤中分解纖維素的細(xì)菌，可以選擇富含纖維素的環(huán)境，如樹林中多年落葉形成的腐殖土。

（2）微生物培養(yǎng)時(shí)，不同的微生物需要不同的培養(yǎng)溫度和時(shí)間，細(xì)菌一般在30～37℃的溫度下培養(yǎng)1～2d；放線菌一般在25～28℃的溫度下培養(yǎng)5～7d；霉菌一般在25～28℃的溫度下培養(yǎng)3～4d。

（3）分解尿素的細(xì)菌能合成的脲酶將尿素分解成了氨氣，氨氣會使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，加入酚紅試劑會變紅，則說明培養(yǎng)基的PH升高，這樣可以鑒定這種細(xì)菌可以分解尿素。要鑒定是否有分解纖維素的細(xì)菌，在長出菌落的培養(yǎng)基上，覆蓋剛果紅染液，再加入1 mol/L的NaCl溶液，以洗去未與纖維素結(jié)合的剛果紅，一段時(shí)間后，倒去該溶液，若菌落的周圍出現(xiàn)透明圈，說明此細(xì)菌能分解纖維素。

比較 項(xiàng)目	土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離	分解纖維素的微生物的分離
方法	利用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)	利用纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)
原理	只有分解尿素的細(xì)菌能夠合成脲酶,才能在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上生長	因?yàn)榕囵B(yǎng)基中含有豐富的纖維素,因此能夠分解纖維素的微生物具有更多的生存機(jī)會而大量繁殖
鑒定	在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,指示劑變紅說明尿素被分解,從而說明菌落中的菌體為分解尿素的細(xì)菌	剛果紅染色法，菌落周圍出現(xiàn)紅色消失的透明圈，該菌落為分解纖維素的微生物菌落