Question

【題目】人類疾病的轉(zhuǎn)基因動物模型常用于致病機理的探討及治療藥物的篩選。利用正常大鼠制備遺傳性高血壓轉(zhuǎn)基因模型大鼠的流程如圖所示（注：基因B為高血壓相關(guān)基因）。

（1）進行①過程之前，需對人工采集的精子進行 處理。完成②過程常采用的方法是 ，④過程中，為了防止污染，通常還要在細胞培養(yǎng)液中添加一定量的 。

（2）從人體細胞中獲取基因B時用到的工具酶是 ，在構(gòu)建的基因表達載體中，高血壓相關(guān)基因的首端必須有 ，它是RNA聚合酶的識別和結(jié)合部位。

（3）圖示中甲為 （時期）的去核卵母細胞，⑤過程操作技術(shù)叫做 。

（4）要在分子水平上檢測成功導(dǎo)入的B基因在大鼠中是否成功表達，可采用 方法，如果高血壓相關(guān)基因已在大鼠體內(nèi)成功表達，可用其建立高血壓轉(zhuǎn)基因動物模型。

Answer 1

【答案】（1）獲能（2分）顯微注射法 抗生素（2）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶） 啟動子（2分）

（3）減數(shù)第二次分裂中期（MII中期）（2分）核移植（2分） （4）抗原-抗體雜交

【解析】試題分析：(1)過程①表示體外受精的過程，在進行此過程之前，首先需要對精子進行獲能處理。“獲能”是精子與卵子結(jié)合前必需的準備過程，沒有這個過程就不能完成受精。②過程表示的是將外源基因?qū)�入受體細胞，導(dǎo)入動物受精卵一般用顯微注射的方法。動物細胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：無菌、無毒的環(huán)境，培養(yǎng)液應(yīng)進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染。（2）獲取目的基因時可用到的工具酶是限制酶，基因表達載體的構(gòu)建啟動子是為了啟動下游基因的“表達”，表達首先需要轉(zhuǎn)錄，因此RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位才是轉(zhuǎn)錄的起始，DNA聚合酶識別和結(jié)合的部位是DNA復(fù)制的起始。（3）卵細胞培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期時，才具有與精子受精的能力，⑤過程表示細胞核移植技術(shù)。（4）基因工程中，導(dǎo)入了目的基因，但不知道它是否成功表達，即是否合成相應(yīng)蛋白質(zhì)，所以用抗原與抗體雜交技術(shù)，驗證這種蛋白質(zhì)的存在，確定基因是否表達。